[发明专利]修复皮肤屏障的肽及制备化妆品的用途

说明书

本发明公开了修复皮肤屏障的肽及制备化妆品的用途。本发明提供一种大苞鸢尾种子酶解肽，活性研究结果发现该酶解肽既可以促进人角质形成细胞HaCaT细胞增殖，又可以促进HaCaT细胞迁移，而角质形成细胞的增殖和迁移活性直接关系到皮肤屏障功能的维持和受损后的修复，因此，本发明提供的酶解肽具有促进皮肤屏障修复活性的作用，可以用于开发制备促进皮肤屏障修复的化妆品。

技术领域

本发明属于化妆品领域，具体涉及一种修复皮肤屏障的肽及制备化妆品的用途。

背景技术

皮肤是人体的第一道防线，具有重要的屏障功能，可以保护机体免受各种物理、化学及微生物等外界环境因素侵袭。这道屏障还是个多功能屏障，包括物理屏障、微生物屏障、色素屏障、抗氧化屏障、神经屏障和免疫屏障等。其中物理屏障最重要，是其他屏障的基础，它主要依赖的是由角质形成细胞为主的表皮。

角质形成细胞是表皮的主要构成细胞，数量占表皮细胞的80％以上，角质形成细胞的增殖和迁移活性直接关系到皮肤屏障功能的维持和受损后的修复。

人表皮角质形成细胞(HaCaT细胞)源自一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤，目前已经成为表皮屏障功能研究最为常用的细胞。

随着绿色健康理念的深入人心，化妆品活性成分也更多地强调绿色、环保、健康、有效。天然成分在化妆品中的应用越来越常见。在诸多天然成分中，蛋白是含量相对较丰富的一种物质，其存在于植物、动物和微生物中，且易于获得。但是，蛋白是无法直接用作化妆品活性成分的，因为其分子量过大，皮肤细胞根本无法吸收。蛋白的酶解研究应运而生。然后，蛋白酶解的研究难度显然较大，因为一方面酶解过程不太容易精准控制，另一方面得到的酶解肽的高级结构通常被破坏而缺乏活性。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术不足，提供一种修复皮肤屏障的肽及制备化妆品的用途。

本发明上述目的通过如下技术方案实现：

一种酶解肽，通过如下步骤制备：

步骤1、总蛋白的提取

将大苞鸢尾的种子粉末用二氯甲烷热回流脱脂，干燥；将脱脂种子粉末加入蒸馏水加热提取，控制pH值为8.0；收集提取液，先过滤再离心，收集上清液并调节pH值至4.7，离心收集沉淀，蒸馏水复溶、透析，冷冻干燥，得到总蛋白；

步骤2、酶解

将总蛋白加入蒸馏水，55℃保温，调节pH值至8.5，加入碱性蛋白酶，酶解5h；酶解结束后，沸水灭酶，冷却至常温，离心，取上清，冷冻干燥得酶解粗品；

步骤3、超滤

将酶解粗品用蒸馏水复溶，依次采用截留相对分子质量为5kDa和3kDa的超滤膜进行超滤，收集3～5kDa的组分，冷冻干燥得酶解肽。

优选地，蒸馏水提取总蛋白时的提取温度为65℃。

优选地，离心条件为10000r/min离心20min。

优选地，碱性蛋白酶加入质量为底物质量的2％。

优选地，酶解时每20min测定并调节1次pH值。

上述任一酶解肽用于制备促进皮肤屏障修复的化妆品的用途。

有益效果：

本发明提供一种大苞鸢尾种子酶解肽，活性研究结果发现该酶解肽既可以促进人角质形成细胞HaCaT细胞增殖，又可以促进HaCaT细胞迁移，而角质形成细胞的增殖和迁移活性直接关系到皮肤屏障功能的维持和受损后的修复，因此，本发明提供的酶解肽具有促进皮肤屏障修复活性的作用，可以用于开发制备促进皮肤屏障修复的化妆品。

附图说明