[发明专利]一种多氧孕甾烷类化合物亚乎奴甾G的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种多氧孕甾烷类化合物亚乎奴甾G的制备方法，其特征在于，所述的亚乎奴甾G是从亚乎奴药材中制备得到，分子结构式为：

亚乎奴甾G(cissasteroidG)；

制备方法是：以亚乎奴莲药材30.5～50.7kg为原料，以2～5倍原料重量体积、体积浓度为95％的乙醇加热回流提取3次，重量体积是指固体以kg计，液体L计，提取温度为92～95℃，每次提取时间为1～1.5小时，减压回收乙醇，得浸膏状的乙醇提取物，乙醇提取物混悬于4.8～9L的蒸馏水中，依次以石油醚、二氯甲烷、正丁醇萃取3次，每次4.8～9L，时间为3～5小时，回收溶剂，得到石油醚萃取部位、二氯甲烷萃取部位、正丁醇萃取部位；将二氯甲烷萃取部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100︰0、100︰1、100︰3、100︰5、100︰10、100︰30、100︰50、1︰1、1︰2的石油醚-丙酮混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用6.7～9.3L洗脱液，流速为10～15mL/min，每670～930mL体积为一流份，收集90个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比1︰1的石油醚-丙酮和体积比10︰1的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3～5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1～30、流份31～50、流份51～60、流份61～70、流份71～90，得到组份Fr.1～Fr.5；组份Fr.4经MCI柱色谱，经体积比甲醇-水溶液10︰90、30︰70、40︰60、70︰30、80︰20梯度洗脱，每一梯度用300～500mL洗脱液，流速为20～35mL/h，每一洗脱梯度为一流份，收集5个亚组份Fr.4-1、Fr.4-2、Fr.4-3、Fr.4-4、Fr.4-5；亚组份Fr.4-4经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为10︰1、8︰1、5︰1、3︰1、2︰1、1︰1、1︰2的石油醚-乙酸乙酯混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用24mL～40mL洗脱液，流速为2～5mL/min，每24～40mL体积为一流份，收集7个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比1︰1的石油醚-丙酮和体积比10︰1的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3～5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1～2、流份3、流份4、流份5～7，得到组份Fr.4-4-1～Fr.4-4-4；将组份Fr.4-4-4经Sephadex LH-20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，流速为10～15mL/h，每10～17mL为一流份、收集20个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，以体积比7︰1的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3～5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份3～5、流份6～17、流份18～20，得到3个亚组份Fr.4-4-4-1、Fr.4-4-4-2、Fr.4-4-4-3；将亚组份Fr.4-4-4-2经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为60︰40的乙腈-水混合溶剂洗脱，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，流速为6mL/min，收集保留时间为48min的色谱峰，回收溶剂，即得亚乎奴甾G。