[发明专利]一种α-地中海贫血相关基因检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种α‑地中海贫血相关基因的检测试剂盒。本发明提供了针对检测α珠蛋白Fusion gene的α‑地中海贫血检测引物组，具体为核苷酸序列如SEQ ID NO：2～3所示引物，并基于此构建了检测试剂盒，操作简单，成本低，特异性高，结果判读直观，易于推广，适用于多种场合使用。而且，该引物组还具有非常好的多体系通用优势，可以与其他检测引物组配进行多重PCR检测，如核苷酸序列如SEQ ID NO：4～5所示的引物或核苷酸序列如SEQ ID NO：6～7所示的引物，能够一次性检测多种类型α‑地中海贫血。本发明提供的技术方案对开展地中海贫血人群筛查，遗传咨询和产前诊断具有重大的意义。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地，涉及一种α-地中海贫血相关基因检测试剂盒。

背景技术

地中海贫血是由于珠蛋白基因发生缺陷，致使珠蛋白链合成减少或缺失，使形成血红蛋白的α-链/非α-链比例失衡，而导致的一种常染色体隐性遗传溶血性疾病，轻者可无临床表现，重者以溶血性贫血为主要特征。根据珠蛋白肽链合成受到抑制的类型，地中海贫血可以分为α-地中海贫血、β-地中海贫血、δ-地中海贫血、γ-地中海贫血、δβ-地中海贫血和εγδβ-地中海贫血等。另外，临床上，该病又分轻型（地中海贫血基因携带者）、中间型和重型3个类型。

α珠蛋白基因位于人类第16号染色体短臂末端的α珠蛋白基因簇中，该基因包括二个重复的α基因（α2和α1）、一个胚胎期类α基因（ζ2）、三个假基因（Ψζ1、Ψα2和Ψα1）和一个功能未知的基因（θ1），其排列顺序为：5′-ζ2-Ψζ1-Ψα2-Ψα1-α2-α1-θ1-3′，全长约30 kb。所以α-地中海贫血基因型中除常见类型：--^SEA、-α^3.7和-α^4.2缺失，以及QS、CS和WS点突变外，仍存在许多罕见缺失或未知突变。

α-地中海贫血的表型严重程度随着功能性α-珠蛋白基因的减少而加重：（1）1个α-基因缺失或点突变（-α/αα或αα^T/αα或α^Tα/αα），称为静止型α-地贫，通常不贫血，血液学表现为小细胞低色素；（2）2个α-基因缺失或复合-α基因点突变，或点突变，其基因型为--/αα或-α/-α或-α/αα^T或α^Tα/-α或α^Tα/α^Tα，称为轻型α-地贫，临床表现为不贫血或轻度贫血，血液学检查有小细胞低色素特征；（3）3个α-基因缺失或复合α基因点突变，基因型为--/-α或--/α^Tα，称为中间型α-地贫，又称Hb H病，患者有轻至重度贫血。某些基因型为α^Tα/α^Tα的病例（如α^CSα/α^CSα、α^QSα/α^QSα和α^CSα/α^QSα）也表现为Hb H病。通常，--/α^Tα的非缺失型Hb H病较单纯缺失型Hb H病（--/-α）的临床表现更为严重，特别是基因型为--/α^CSα或--/α^QSα的Hb H病患者，贫血程度较为严重；（4）4个α-基因缺失，其基因型为--/--，称为重型α-地贫，又称HbBart’s胎儿水肿综合征，此类个体一般无法存活到出生或分娩后半小时内死亡。若仅是一条染色体上的1个α-基因缺失或缺陷，则α-链的合成部分受抑制，称为α⁺地贫；若有一条染色体上的2个α-基因缺失或缺陷，称为α⁰地贫；