[发明专利]一种基于金纳米花颗粒的诺氟沙星免疫快速检测卡

说明书

本发明属于抗生素污染以及食品安全免疫检测领域，具体涉及一种基于金纳米花颗粒的诺氟沙星免疫快速检测卡。该检测卡包括样品垫、纳米花金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和塑料卡壳。其NC膜上设置有C线和T线，C线上喷有羊抗鼠的IgG抗体，T线上包被有BSA‑NOR交联抗原；金标垫上含有纳米花金标记的鼠源单克隆抗体5B1。本发明通过竞争法纳米花免疫检测卡，对样品中诺氟沙星进行快速检测，其检测灵敏度为39 ng/mL，实现了对样品中诺氟沙星残留的高灵敏快速检测，所建立的检测方法方便快捷能够直接用于牛奶等样品中诺氟沙星含量的快速检测。

技术领域

本发明属于抗生素污染以及食品安全免疫检测技术领域，具体涉及一种基于金纳米花颗粒的诺氟沙星免疫快速检测卡。

背景技术

诺氟沙星（NOR）是第三代喹诺酮类抗菌药，会阻碍消化道内致病细菌的DNA旋转酶的作用，阻碍细菌DNA复制，对细菌有抑制作用。诺氟沙星为杀菌剂，通过作用于细菌DNA螺旋酶的A亚单位，抑制DNA的合成和复制而导致细菌死亡。由于诺氟沙星抗生素在养殖业中的滥用，导致了动物性食品中诺氟沙星抗生素的残留。动物性食品中的诺氟沙星抗生素残留不仅会导致光毒性，也会导致耐药性的产生。同时，动物性食品中诺氟沙星的残留会影响奶制品的质量，随着人食用奶制品会严重威胁人们健康。中国农业部已经明令禁止一些抗生素在养殖业中的使用。此外，在食品安全检测中它可以作为评价食品产品质量的一项重要指标。因此需要高灵敏，高通量的检测技术来实现对于诺氟沙星抗生素的检测显得尤为重要。

目前，检测样品中诺氟沙星含量的方法主要包括毛细血管电泳法、电化学免疫传感器、高效液相色谱法等方法。这些方法都利用分析化学的检测手段对样品进行分离鉴定，可以实现诺氟沙星的定量检测。然而，这些方法的操作都需要实验室技术人员的操作以及对样品的预处理，有些还会用到昂贵的实验仪器，因此对样品中诺氟沙星的快速检测带来了一定的困扰。抗原抗体反应具有比例性，可逆性和高度的特异性，因此可以被用作免疫检测以及免疫诊断，目前已经被广泛应用于免疫印迹（WB）、免疫组织化学（IHC）、酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫胶体和纳米花金层析技术（GICA）。应用纳米花金标免疫检测卡可以对诺氟沙星进行快速大批量的定性和半定量检测，而且不需要对样品进行前处理，从而省去了繁琐的步骤和样品处理时间。与其他化学检测方法相比较而言，该检测卡具有灵敏度高，特异性强，快速，简便等特点，被广泛应用于食品安全检测中。

发明内容

本发明的目的在于针对上述问题，提供一种基于金纳米花颗粒的诺氟沙星免疫快速检测卡。利用该检测卡检测样品中的诺氟沙星，缓解了现有技术中缺少一种快速检测诺氟沙星的症结，将检测线和控制线划到同一个卡条上，装入包装壳，滴加微量检测样品等待5-10分钟即可完成全部检测，结果肉眼可见，操作简单易行，且能保证检测卡的灵敏度，提高检测的准确性，避免污染环境，实现对诺氟沙星绿色环保的快速检测。

为了实现上述目的，本发明提供以下技术方案：

一种基于金纳米花颗粒的诺氟沙星免疫快速检测卡，所述检测卡包括样品垫、纳米花金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和塑料卡壳；所述的NC膜上设置有C线和T线，所述的C线上喷有羊抗鼠的IgG抗体，所述的T线上包被有BSA-NOR交联抗原；所述的金标垫上含有金纳米花标记的抗诺氟沙星单克隆抗体5B1。