[发明专利]一种基于DIPP衍生化-HPLC-Chip/QQQ-MS检测痕量胺的方法及其应用在审
| 申请号: | 202111162289.3 | 申请日: | 2021-09-30 |
| 公开(公告)号: | CN113945675A | 公开(公告)日: | 2022-01-18 |
| 发明(设计)人: | 伍建林;李娜;张毅达;卞西清 | 申请(专利权)人: | 澳门科技大学 |
| 主分类号: | G01N30/88 | 分类号: | G01N30/88;G01N30/08 |
| 代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 齐键 |
| 地址: | 中国澳门氹*** | 国省代码: | 澳门;82 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 基于 dipp 衍生 hplc chip qqq ms 检测 痕量 方法 及其 应用 | ||
1.一种基于DIPP衍生化-HPLC-Chip/QQQ-MS检测痕量胺的方法,其特征在于:包括如下步骤:
S1:将痕量胺类化合物进行DIPP衍生化,得到混合物;
S2:将S1制得的混合物进行HPLC-Chip分析,分离DIPP衍生化痕量胺类化合物;
S3:采用QQQ-MS定量分析S2分离的DIPP衍生化痕量胺类化合物。
2.根据权利要求1所述的基于DIPP衍生化-HPLC-Chip/QQQ-MS检测痕量胺的方法,其特征在于:所述DIPP衍生化的衍生化试剂包括反应液A与反应液B的混合溶液;所述反应液A为乙醇与三乙胺的混合溶液,所述反应液B为DIPP与四氯化碳的混合溶液。
3.根据权利要求1所述的基于DIPP衍生化-HPLC-Chip/QQQ-MS检测痕量胺的方法,其特征在于:所述DIPP衍生化为在冰浴中反应0min~40min。
4.根据权利要求1所述的基于DIPP衍生化-HPLC-Chip/QQQ-MS检测痕量胺的方法,其特征在于:所述HPLC-Chip液相分析包括如下步骤:所述S1制得的混合物经富集柱富集后再经色谱分析柱分析;优选的,所述S1制得的混合物上样经富集柱富集0~5min后,再经色谱分析柱分析。
5.根据权利要求4所述的基于DIPP衍生化-HPLC-Chip/QQQ-MS检测痕量胺的方法,其特征在于:所述富集柱的条件为:富集柱的填充材料为C18,流动相为含甲酸的乙腈;流速为(1~5)μL/min;进一步优选的,流动相为含0.1vol%甲酸的20vol%乙腈;流速为3μL/min。所述色谱分析柱条件为:色谱分析柱填充材料为C18,流动相为包括流动相A为甲酸-水溶液;流动相B为甲酸-乙腈溶液组成,流速为(0.1~1)μL/min,梯度洗脱;优选的,所述HPLC-Chip梯度洗脱为:以体积分数计,0~2min,60%流动相A,40%流动相B;2~10min,60%~5%流动相A,40%~95%流动相B;10~15min,流动相A5%,95%流动相B;流速为0.5μL/min。
6.根据权利要求1所述的基于DIPP衍生化-HPLC-Chip/QQQ-MS检测痕量胺的方法,其特征在于:所述QQQ-MS定量分析的质谱条件为正离子模式,扫描方式为动态多反应监测离子扫描;所述正离子模式中,目标定量离子对包括所述DIPP衍生化痕量胺类化合物定量离子对,目标定量离子的动态多反应监测离子扫描的质/荷比条件包括:所述DIPP衍生化痕量胺类化合物的母离子286.2m/z~385.2m/z,对应的子离子105.0~246.1m/z。
7.根据权利要求6所述的基于DIPP衍生化-HPLC-Chip/QQQ-MS检测痕量胺的方法,其特征在于:所述质谱条件还包括:电离源为电喷雾电离ESI源,气帘气温度200℃~250℃;气帘气流速:7L/min~15L/min;毛细管电压:1500V~2000V。
8.根据权利要求1所述的基于DIPP衍生化-HPLC-Chip/QQQ-MS检测痕量胺的方法,其特征在于:所述痕量胺类化合物选自奥克巴胺、酪胺、苯乙胺、色胺、肾上腺素、多巴胺或其前体或其代谢物、血清素或其前体或其代谢物中的至少一种。
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