[发明专利]用于检测牛带绦虫的引物、探针、试剂盒及应用

说明书

本发明公开了用于检测牛带绦虫的引物、探针、试剂盒及应用，属于生物工程技术领域。引物可扩增牛带绦虫线粒体细胞色素C氧化酶1基因中的保守区域，探针与引物扩增的牛带绦虫线粒体细胞色素C氧化酶1基因的保守区域杂交。利用本发明引物、探针、试剂盒进行牛带绦虫的检测，灵敏度高，特异性强，适于推广应用。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及用于检测牛带绦虫的引物、探针、试剂盒及应用。

背景技术

牛带绦虫(Taenia saginata)又名牛肉绦虫、肥胖带绦虫或无钩绦虫，是扁形动物门(Platyhelminths)绦虫纲(Cestoda)圆叶目(Cyclophyllidea)带科 (Taeniidae)带属(Taenia)人畜共患寄生虫。其以人为其唯一终末宿主；牛科动物黄牛与水牛是最主要的中间宿主；野山羊、野猪、驯鹿、美洲驼、角马、狐、绵羊等也可作为中间宿主。

牛带绦虫病是由牛带绦虫成虫寄生人体小肠引起的一种肠绦虫病，主要在吃牛肉、尤其有生食牛肉习惯的地区中流行，一般地区则多为散发病例。

牛囊尾蚴病也称牛囊虫病，病原体是牛带绦虫的幼虫—牛囊尾蚴(Cysticercusbovis)，其可寄生于牛全身各肌肉组织及肺、肝、脑等器官，造成机械损伤甚至神经症状，不仅影响畜牧业的发展，造成重大经济损失，而且该病还是一种人畜共患寄生虫病，给人体健康带来严重威胁，会严重影响畜牧业生产的经济效益，是肉品卫生检验的重点项目之一。

现有的用于检测牛带绦虫的方法包括涂片检测、免疫学检测、常规PCR检测，但其检测特异性、灵敏度均有待提高。因此，如何提供一种对牛带绦虫检测灵敏度高、特异性强的产品是本领域亟待解决的问题。

发明内容

本发明公开了用于检测牛带绦虫的引物、探针、试剂盒，将其用于牛带绦虫的检测，灵敏度高，特异性强。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

用于检测牛带绦虫的引物，包括正向引物和反向引物，

正向引物与反向引物用于扩增牛带绦虫线粒体细胞色素C氧化酶1基因中的保守区域。

线粒体细胞色素C氧化酶1(Cytochrome coxidase subunit 1,COX1)是呼吸链末端的限速酶，参与能量供应，细胞凋亡，新陈代谢，活性氧产生等重要的生理过程，本发明利用其基因保守区域设计引物，用于牛带绦虫的扩增检测，灵敏度高，特异性强。

优选地，正向引物核苷酸序列为：5'-CGTTTAAATGCTTYAAGTGCR TG GTT-3'，SEQ IDNO:3；

反向引物核苷酸序列为：5'-CTACTTGAAAATAATGAYGACGACAAA G- 3'，SEQ ID NO:4。

上述用于检测牛带绦虫的引物在制备检测牛带绦虫的产品中的应用。

用于检测牛带绦虫的探针，与权利要求1或2引物扩增的牛带绦虫线粒体细胞色素C氧化酶1基因的保守区域杂交。

优选地，上述探针核苷酸序列为5'FAM-GTTCGGTTACTATGATAATAGG AGTACCAACAGG-MGB 3'，SEQ ID NO:5。

上述用于检测牛带绦虫的引物在制备检测牛带绦虫的产品中的应用。

用于检测牛带绦虫的试剂盒，包括用于检测牛带绦虫的引物。

优选地，上述用于检测牛带绦虫的试剂盒，还包括上述用于检测牛带绦虫的探针。

优选地，上述用于检测牛带绦虫的试剂盒，还包括标准品，标准品为含有牛带绦虫线粒体细胞色素C氧化酶1基因的质粒。