[发明专利]一种超临界流体色谱分离方法及装置

说明书

本申请公开了一种超临界流体色谱分离方法及装置，超临界流体色谱分离方法包括：将样品放置于预分离装置中；将预分离装置的一端与色谱柱柱前管路连接，预分离装置的另一端与超临界流体制备色谱柱连接；以超临界二氧化碳作为提取溶剂，对样品进行预分离，将预分离后目标组分加载至超临界流体制备色谱柱；将色谱柱柱前管路连接至所述超临界流体制备色谱柱；以超临界二氧化碳和改性剂为流动相，分离目标组分。本申请所采用的超临界流体色谱分离方法，能够一步完成样品的提取、前处理、上样和分离，解决超临界流体色谱中样品溶解试剂的强度和粘度与流动相不匹配的问题，消除上样溶剂和样品中杂质对超临界流体色谱分离的干扰。

技术领域

本申请涉及色谱技术领域，具体涉及一种超临界流体色谱分离方法及装置。

背景技术

近年来，以环境友好的亚临界/超临界二氧化碳(Sc-CO₂)为流动相的超临界流体色谱(Supercritical Fluid Chromatography，SFC)被认为是一种绿色环保，高效快速的分离技术。与液相色谱(Liquid Chromatography，LC)相比，SFC具有更快的流速(大约是LC的3倍)，更高的分离通量以及更低的有机溶剂消耗。特别是制备型SFC，因分离条件温和，分离快速，后处理简便，在样品纯化方面有着一定的优势。

然而，样品的溶解一直是SFC分离的难点问题。SFC的流动相由超临界CO₂和一定比例的改性剂组成。样品大多数溶解在改性剂中，其强度和粘度与SFC流动相不匹配，常导致谱带展宽，分离度下降，重复性变差。这个问题在制备SFC上更为突出，甚至样品会在进样后有析出再溶解的过程，导致色谱峰严重失真。另外，在分离复杂样品时，杂质的干扰常常成为SFC高效分离的阻碍。复杂样品的极性分布范围较广，增加了样品溶解的难度，而且有些杂质在SFC上不易洗脱，也给分离造成了困扰。综上所述，迫切需要开发一种同时解决制备SFC中进样溶剂不匹配和杂质干扰问题的方法。

发明内容

本申请提供一种超临界流体色谱分离方法及装置，可以一步实现样品的提取、前处理、上样和分离。

本申请提供一种超临界流体色谱分离方法，包括：将样品放置于预分离装置中；将预分离装置的一端与色谱柱柱前管路连接，预分离装置的另一端与超临界流体制备色谱柱连接；以超临界二氧化碳作为提取溶剂，对样品进行预分离，将预分离后目标组分加载至超临界流体制备色谱柱；将色谱柱柱前管路连接至所述超临界流体制备色谱柱；以超临界二氧化碳和改性剂为流动相，分离目标组分。

可选的，在本申请的一些实施例中，预分离包括提取、前处理和上样。

可选的，在本申请的一些实施例中，样品与色谱填料混合后放置于预分离装置中。

可选的，在本申请的一些实施例中，提取溶剂还包括改性剂，改性剂占超临界二氧化碳与改性剂总流量的0～10％。

可选的，在本申请的一些实施例中，改性剂包括甲醇、乙醇、异丙醇或乙腈中的至少一种。

可选的，在本申请的一些实施例中，色谱填料包括硅胶基质填料或大孔树脂填料。

可选的，在本申请的一些实施例中，色谱填料的粒径范围可以为10～60μm，也可以为20～50μm，还可以为30～40μm。

可选的，在本申请的一些实施例中，样品包括白花蛇舌草或高良姜或其提取物。

可选的，在本申请的一些实施例中，样品和色谱填料的质量比可以为1:(1.5～10)，也可以为1:(2～9)，还可以为1:(3～8)。

可选的，在本申请的一些实施例中，在预分离的条件中，超临界二氧化碳的流速范围可以为5～50mL/min，也可以为10～40mL/min，还可以为20～30mL/min。