[发明专利]一种溪黄草的分子鉴定试剂盒及鉴定方法

说明书

本发明公开了一种溪黄草的分子鉴定试剂盒及鉴定方法。本发明利用ISSR标记以及扩增所得测序结果，设计筛选得到了一对可特异性检测溪黄草的ISSR‑SCAR标记引物，并在此标记引物的基础上提供了一种溪黄草的分子鉴定试剂盒及鉴定方法，可避免因居群间的多样性而导致假阳性的发生，适于对溪黄草进行快速准确的鉴定。

技术领域

本发明属于生物技术领域。更具体地，涉及一种溪黄草的分子鉴定试剂盒及鉴定方法。

背景技术

溪黄草(Rabdosia serra(Maxim.)Hara)为唇形科香茶菜属的一种多年生草本植物，具有清热利湿，退黄祛湿，凉血散瘀的功效，可用于治疗急性黄疸型肝炎，急性胆囊炎，痢疾，肠炎，跌打瘀痛等病症。同时，溪黄草中含有的溪黄草素A和溪黄草甲素等具有显著抗癌活性的成分，开发潜力巨大。而溪黄草药材作为我国岭南地区常用特色草药，《广东省中药材标准》收录其为唇形科(Labiatae)植物线纹香茶菜(Rabdosia lophanthoides)及其变种纤花香茶菜(Rabdosia lophanthoides var.graciliflora)或溪黄草(Rabdosia serra)的干燥地上部分。此外，长叶香茶菜(Rabdosia stracheyi)和显脉香茶菜(Rabdosianervosa)在岭南民间也作为溪黄草药材使用。溪黄草药材中，同归属于皱叶香茶菜组的线纹香茶菜、纤花香茶菜及长叶香茶菜，在植物形态特征上比较相似，相互间不易区分，同属于香茶菜组的溪黄草及显脉香茶菜在植物形态特征上亦比较相似，给溪黄草及其基原植物的真伪鉴定带来了一定的困难。

鉴于从形态上区分植物溪黄草较为困难，因此可考虑分子鉴定的方式。中国专利CN 104404129A公开了一种DNA条形码鉴别溪黄草及其近属的方法，该专利提供了一种包括唇形科植物溪黄草和线纹香茶菜的IST2基因序列片段的基因库，通过PCR扩增ITS2序列后与基因库进行比对的方式鉴别所测植物是否为溪黄草或线纹香茶菜，但该鉴定方法需对PCR扩增产物进行测序，所需时间和成本增加。中国专利CN 104404629A公开了一种溪黄草及纤花线纹香茶菜的DNA鉴别方法，该专利公开了一种包括溪黄草和线纹香茶菜的rbcl基因序列片段的基因库，通过PCR扩增rbcl序列后与基因库序列进行比对的方式对所测植物进行鉴定，但该方法同样需要对PCR产物进行测序。因此，开发一种能快速、准确鉴定植物溪黄草的方法，对确保溪黄草入药的准确性具有重要意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有上述技术的缺陷和不足，提供一种溪黄草的分子鉴定试剂盒及鉴定方法。

本发明的第一个目的是提供一种用于鉴定溪黄草的ISSR-SCAR标记引物。

本发明的第二个目的是提供一种溪黄草的分子鉴定试剂盒。

本发明的第三个目的是提供一种溪黄草的分子鉴定方法。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

本发明利用ISSR标记以及扩增所得测序结果，设计筛选得到了一对可特异性检测溪黄草的ISSR-SCAR标记引物，引物序列如SEQ ID NO.1～2所示，并在此标记引物的基础上提供了一种溪黄草的分子鉴定试剂盒及鉴定方法。

本发明提供了一种用于鉴定溪黄草的ISSR-SCAR标记引物，引物序列如SEQ IDNO.1～2所示。

本发明还提供了一种溪黄草的分子鉴定试剂盒，所述试剂盒中含有SEQ ID NO.1～2所示引物。

上述试剂盒中还含有PCR扩增所需试剂。

本发明还提供了SEQ ID NO.1～2所示引物在鉴定溪黄草或制备鉴定溪黄草的产品中的应用。

本发明还提供所述分子鉴定试剂盒在鉴定溪黄草中的应用。