[发明专利]一种二氨基庚二酸脱氢酶突变体及其应用有效
| 申请号: | 202111034043.8 | 申请日: | 2021-09-03 |
| 公开(公告)号: | CN113564138B | 公开(公告)日: | 2023-07-18 |
| 发明(设计)人: | 徐建中;刘宁;吴慧雯 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
| 主分类号: | C12N9/06 | 分类号: | C12N9/06;C12N15/56;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/08;C12R1/19 |
| 代理公司: | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人: | 王玉仙 |
| 地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 二氨基庚二酸 脱氢酶 突变体 及其 应用 | ||
1.一种二氨基庚二酸脱氢酶突变体,其特征在于,所述突变体是将氨基酸序列如SEQID NO.1所示的二氨基庚二酸脱氢酶的第36位精氨酸突变为谷氨酸获得。
2.一种权利要求1所述的二氨基庚二酸脱氢酶突变体的编码基因。
3.根据权利要求2所述的编码基因,其特征在于,所述编码基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示。
4.一种携带权利要求2或3所述编码基因的重组质粒。
5.根据权利要求4所述的重组质粒,其特征在于,所述的重组质粒是以pET系列载体为表达载体。
6.一种表达权利要求1所述二氨基庚二酸脱氢酶突变体的基因工程菌。
7.根据权利要求6所述的基因工程菌,其特征在于,所述基因工程菌是以大肠杆菌为宿主。
8.一种权利要求6或7所述的基因工程菌的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)表达载体pET-28a-ddh的构建
将核酸序列如SEQ ID NO.1所示的ddh片段与经相同限制性内切酶酶切后的E.coli的表达质粒pET-28a相连构建重组质粒pET-28a-ddh;
(2)重组菌株E.coli BL21(DE3)pET-28a-ddh 36位突变子的构建
将质粒pET-28a-ddh转化至E.coli BL21(DE3),再进行突变并筛选得到重组菌E.coliBL21(DE3)pET-28a-ddhArg36Glu。
9.权利要求1所述二氨基庚二酸脱氢酶突变体在饲料工业、医药工业或食品工业中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述的应用具体是以四氢吡啶为底物,催化还原胺化反应生成产物L-赖氨酸。
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