[发明专利]一种快速提取不同山椒素单体的方法

说明书

本发明属于天然药物提取分离及局部麻醉药物制剂技术领域，具体涉及一种快速同时提取羟基‑α‑山椒素和羟基‑β‑山椒素的方法，同时提取获得羟基‑α‑山椒素在制备纳米脂质载体中的应用。(1)用乙醇提取，正己烷萃取得山椒素粗品；(2)采用柱层析法和冷冻干燥法分别得到高纯度羟基‑α‑山椒素和羟基‑β‑山椒素。本发明制备方法操作简单，条件温和，聚酰胺可回收，回收率高，即保证了两种山椒素纯度，又降低了操作成本。同时本发明公开了一种羟基‑α‑山椒素纳米结构脂质载体及其制备方法。该制剂通过缓释释放，具有良好的镇痛效果。

技术领域

本发明属于天然药物提取分离及局部麻醉药物制剂技术领域，具体涉及一种快速同时提取羟基-α-山椒素和羟基-β-山椒素的方法，同时提取获得羟基-α-山椒素在制备纳米脂质载体中的应用。

背景技术

花椒(Zanthoxylum L)属芸香科植物，其果实我国常用的食品调味料，具有浓郁香气和辛辣味。不仅如此，花椒也是一味传统中药，具有温中散寒、除湿、杀虫、止痛等作用，可用于治疗呕吐、腹泻、驱虫等疾病。其有效成分具有抑菌、抗炎、除皱、降血糖血脂、胃肠道保护、止痒镇痛和祛风除湿等作用。

在花椒应用中，花椒属植物中链状不饱和脂肪酸酰胺为花椒辛辣味物质。目前，从花椒中发现的酰胺类物质有25种，主要有：α-山椒素、β-山椒素、γ-山椒素、羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素、羟基-γ-山椒素等。由于花椒中山椒素类化合物结构极其相似，多为顺反异构，因此，从中提取分离纯化得到高纯度各种不同山椒素单体的难度较大，更何况能够同时分别得到两种或以上的山椒素单体。

现已有专利公开了一种羟基山椒素混合物的制备方法(CN103099163A)、一种羟基-α-山椒素单体的制备方法(CN 112321450A和CN106977416A)和一种羟基-β-山椒素单体的制备方法(CN 105481711A)。虽然现已有多种山椒素单体制备方法，如利用有机溶剂提取、柱层析(Ag离子反相柱层析与非极性聚苯乙烯大孔树脂柱层析联用、半制备液相等)、紫外照射等方法，能够得到高纯度山椒素单体，而两种或以上高纯度、高收率的山椒素单体的同时制备方法仍是空白，且该方法存在操作复杂、分离率低、柱层析填料回收率低等问题，导致花椒麻味物质无法应用于工业生产，很大程度上限制了花椒麻味物质的研究。

疼痛是保护身体免受有害刺激的重要反应，对化学、机械或热刺激的反应，外周伤害性感受器被激活，将伤害性反应带到中枢神经系统。现临床上，非甾体抗炎药、阿片类药物、局麻药、抗惊厥药和抗抑郁药被应用于术前麻醉和术后止痛，然而，其麻醉镇痛效果受与其相关的药物不良反应限制，如恶心、呕吐、头晕、过敏、呼吸抑制、胃肠蠕动减少和中性粒细胞功能障碍等。长期服用阿片类药物容易产生耐受性和依赖性。同时，频繁给药会增加患者血药浓度波动、降低依从性，造成疼痛，甚至导致严重的副作用。因此，安全有效的疼痛管理对于缓解患者疼痛以及减少药物不良反应非常重要，降低麻醉药物不良反应已成为重点关注问题。

羟基-α-山椒素是青花椒提取物中一种具有麻醉镇痛效果的活性酰胺类物质。早期其被广泛应用于牙齿和关节术后镇痛，能够有效地达到麻木和镇痛效果。作为局部麻醉药物，羟基-α-山椒素能够作用于手术部位及其周围神经，通过阻断神经细胞膜中钠和其他离子通道，可逆性阻滞神经冲动传导，从而停止向大脑传递疼痛信号，控制特定部位的术后疼痛。现研究表明羟基-α-山椒素主要作用机制为特异性识别并抑制双孔KCNK通道(KCNK3、KCNK9和KCNK18)，也会引起麻木作用。同时能够通过阻断体感神经元亚群中的各种离子通道，来调节急性疼痛和炎症性疼痛，达到镇痛效果。

然而花椒中多数不饱和烷基酰胺在水中都表现出不稳定性，如，羟基-α-山椒素的水溶液在室温下储存4周，会有50％的降解。在紫外照射下迅速减少，8h后减少了95.9％，且转化为其同分异构体羟基-β-山椒素。在160℃条件下，溶于植物油中的山椒素在1小时内大约有30％转化为无活性的结构，其分子中的共轭三烯结构可能对氧气也有较强的敏感性。其不稳定性限制了羟基-α-山椒素在药品和化妆品行业的发展。

发明内容