[发明专利]野生白鬼笔组织分离制备母种方法

权利要求书

1.野生白鬼笔组织分离制备母种方法，其特征在于，所述方法是采用野生白鬼笔的菌柄包被组织进行组织分离并纯化后得到母种。

2.根据权利要求1所述的野生白鬼笔组织分离制备母种方法，其特征在于，所述方法具体包括以下步骤：

S1：采集自然野外生长的白鬼笔菌蕾和开伞白鬼笔，获得分离原材料；

S2：通过无菌处理，获得无菌分离材料菌柄包被，将菌柄包被转入母种培养基中进行培养；

S3：培养至菌丝萌发转移至木屑培养基中获得木屑培养基母种；

S4：通过菌丝尖端提纯复壮得到纯化母种，转接原种、栽培种，最后通过仿野生种植进行栽培得到子实体；

S5：通过子实体组织分离进行系统选育，经过3-5年的系统培育，人工驯化，得到性状稳定、可用于繁殖生产的白鬼笔母种。

3.根据权利要求2所述的野生白鬼笔组织分离制备母种方法，其特征在于，所述S2步骤具体为：在无菌超净台上，对于未开伞的白鬼笔菌蕾，用75％酒精浸泡表面消毒后，用无菌吸水纸吸干表面水分，再用灼烧烫的解剖刀纵向切开菌蕾，用无菌镊子夹掉菌柄，使菌柄包被露出，夹取菌柄包被大小为5mm见方的组织转入母种培养基中进行培养；

对于开伞白鬼笔，先齐菌托处切掉菌柄，将子实体倒立用75％酒精冲洗干净，再用无菌水冲洗，最后用无菌纸擦拭，用无菌镊子分开菌托，去掉菌柄，再用无菌镊子夹取菌柄包被大小为5mm见方的组织转入母种培养基中培养。

4.根据权利要求3所述的野生白鬼笔组织分离制备母种方法，其特征在于，每升所述母种培养基包括以下原料：青杠木屑40g，箭竹叶10g，马铃薯200g，葡萄糖20g，蛋白胨5g，琼脂粉10g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.5g。

5.根据权利要求4所述的野生白鬼笔组织分离制备母种方法，其特征在于，所述木屑培养基包括以下重量份原料：青杠木屑78重量份，麦麸20重量份，磷酸二氢钾1重量份，硫酸镁0.5重量份，石膏0.5重量份。

6.根据权利要求1-5任一权利要求所述的野生白鬼笔组织分离制备母种方法，其特征在于，所述S3步骤中，当菌丝萌发至1-2cm转移至木屑培养基中。