[发明专利]一种颈动脉粥样硬化家兔模型造模及检测方法

权利要求书

1.一种颈动脉粥样硬化家兔模型造模及检测方法，包括选取实验材料、分组、造模、取材、血清制备、石蜡切片、检测七个步骤，其特征在于，所述造模步骤中包括饲养和施术两个过程。

2.根据权利要求1所述的一种颈动脉粥样硬化家兔模型造模及检测方法，其特征在于，所述选取实验材料过程中，采用新西兰雄性家兔，4月龄，普通级，体重2.0—2.5kg。

3.根据权利要求1所述的一种颈动脉粥样硬化家兔模型造模及检测方法，其特征在于，家兔适应性饲养后，称重，在分组过程中，将新西兰家兔随机分成正常对照组、模型组两组。

4.根据权利要求1所述的一种颈动脉粥样硬化家兔模型造模及检测方法，其特征在于，所述施术过程前，实验动物术前12h禁食，不禁水；

在实验中，严格无菌条件下进行，动物经3％戊巴比妥钠30mg/kg静脉麻醉，颈部脱毛清洁消毒后，作颈正中切皮，于甲状软骨上方水平分离右侧颈总动脉，长约2.5cm，两端以动脉夹阻断血流，4号头皮针尽可能平行于血管纵轴方向穿刺进入阻断血流的血管，生理盐水冲洗置换出管腔内的血液后，按上已调节好流量为250ml/min的气流，历时5min，造成内皮干燥，然后管腔内充满生理盐水，放开临时动脉夹恢复血流；

湿润棉片轻轻压迫穿刺点3-5min止血，待颈总动脉完全止血且血流通畅后缝合皮肤；

术后每只给予庆大霉素肌注(按照成人等效剂量换算)，连续3天。

5.根据权利要求1所述的一种颈动脉粥样硬化家兔模型造模及检测方法，其特征在于，12周后，耳缘静脉注射空气10-20ml处死家兔，取右侧颈总动脉。暂且放入液氮罐中保存24h，取部分放入4％多聚甲醛液固定(用于HE染色)，余放入-80℃冰箱冷冻保存。

6.根据权利要求1所述的一种颈动脉粥样硬化家兔模型造模及检测方法，其特征在于，所述血清制备的方法为：

腹主动脉取血，装于10ml离心管内，标记组别编号，3000rpm离心15min,制备血清，用于测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度蛋白胆固醇(LDL-C)-80℃保存备用。

7.根据权利要求1所述的一种颈动脉粥样硬化家兔模型造模及检测方法，其特征在于，所述石蜡切片的方法为：

组织在4％多聚甲醛液固定48h后，清水浸泡，流水洗净，常规石蜡包埋。

8.根据权利要求1所述的一种颈动脉粥样硬化家兔模型造模及检测方法，其特征在于，所述检测方式中包括：HE染色、内皮细胞生存率和血脂检查。