[发明专利]一种番鸭细小病毒POCT检测试纸条及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种番鸭细小病毒POCT检测试纸条，其特征在于，包括底板以及依次搭接固定于所述底板上的样品垫、结合垫、检测膜和吸水垫；

其中，所述结合垫上喷涂有荧光微球标记抗体，所述荧光微球标记抗体为采用荧光微球标记的MDPV抗体Ⅰ和兔抗羊IgG抗体的偶联物；

所述检测膜上包被有检测抗体，所述检测抗体包括MDPV抗体Ⅱ和兔抗羊IgG抗体；其中，所述MDPV抗体Ⅱ用作检测线，所述兔抗羊IgG抗体用作质控线。

2.根据权利要求1所述的番鸭细小病毒POCT检测试纸条，其特征在于，所述结合垫上荧光微球标记抗体的喷涂量为0.04-0.05μg/cm，所述检测膜上检测抗体的包被量分别为0.4-1.2μg/cm。

3.根据权利要求1所述的番鸭细小病毒POCT检测试纸条，其特征在于，采用番鸭胚繁殖的MDPV病毒尿囊液纯化得到的MDPV病毒作为抗原，经动物免疫，制备MDPV抗体Ⅰ和MDPV抗体Ⅱ，得到的4株单克隆抗体，包括MDPV Ab1#、MDPV Ab2#、MDPV Ab3#和MDPV Ab4#。

4.根据权利要求1所述的番鸭细小病毒POCT检测试纸条，其特征在于，所述荧光微球标记抗体的制备方法，包括以下步骤：

荧光微球加入到2-吗啉乙磺酸中，混匀；再加入NHS和EDC进行活化；

除去未反应或残余的反应物后，离心，复溶，加入待标记抗体，偶联1-3h；

封闭未偶联的反应基团，离心，复溶，保持备用。

5.根据权利要求4所述的番鸭细小病毒POCT检测试纸条，其特征在于，所述结合垫的制备方法，包括以下步骤：

采用预处理液处理玻璃纤维素膜，干燥；喷涂荧光微球标记抗体后，干燥；

其中，所述预处理液的成分包括：BSA、PVP、Tween-20、蔗糖、酪蛋白钠、氯化钠和水。

6.根据权利要求1所述的番鸭细小病毒POCT检测试纸条，其特征在于，所述样品垫的制备方法，包括以下步骤：

采用样品垫处理液处理玻璃纤维素膜，干燥；

其中，所述样品垫处理液的成分包括：BSA、酪蛋白钠、表面活性剂S9、胆酸和Tris-HCl缓冲液，pH8.4。

7.一种如权利要求1-6任一项所述的番鸭细小病毒POCT检测试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将MDPV抗体Ⅱ和兔抗羊IgG抗体包被在检测膜上，所述MDPV抗体Ⅱ用作检测线，所述兔抗羊IgG抗体用作质控线，35-40℃干燥；

(2)将荧光微球标记抗体喷涂在结合垫上，35-40℃干燥10-14h；

(4)将样品垫、结合垫、检测膜和吸水垫依次搭接固定于底板上，组装好后，切割成试纸条，加干燥剂后，密闭保存。

8.一种番鸭细小病毒的POCT荧光定量检测试剂盒，其特征在于，包括盒体以及设置在盒体内的如权利要求1-6任一项所述的番鸭细小病毒POCT检测试纸条。

9.一种如权利要求1-6任一项所述的番鸭细小病毒POCT检测试纸条或如权利要求8所述的番鸭细小病毒的POCT荧光定量检测试剂盒在检测番鸭细小病毒中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，检测样品为鸭胚尿囊液、组织研磨上清液或血清中的一种或多种。