[发明专利]一种抗体纯化过程中配基脱落的复合物去除方法

权利要求书

1.一种抗体纯化过程中配基脱落的复合物去除方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)真核蛋白表达：对B1蛋白和B2蛋白进行蛋白质表达设计，然后进行质粒构建和质粒提取，完成质粒提取后转染到目标细胞中进行表达；

2)蛋白纯化和鉴定：对表达的蛋白分别进行纯化，去除宿主残留蛋白和内毒素等，得到纯度较高的B1蛋白和B2蛋白，对蛋白进行鉴定；

3)蛋白偶联：将B1蛋白和B2蛋白按照一定的比例偶联成B1-B2聚合物，去除该聚合物中未偶联的残余蛋白，保证聚合物含量在90％以上；

4)聚合物-亲和柱偶联：将B1-B2聚合物以一定的比例定向偶联于亲和柱上，并形成聚合物亲和柱，封闭未结合聚合物的位点；

5)配基脱落去除：对抗体进行亲和纯化，将中和后的抗体与聚合物亲和柱混合以去除配基复合物；

6)收样入库：收集去除配基复合物的流穿液，经过透析或者脱盐，收样入库；

7)聚合物亲和柱回收：通过低pH酸碱或者盐洗脱挂在聚合物亲和柱柱上的复合物，柱子再生后，可重复用于下一批次纯化。

2.根据权利要求1所述的一种抗体纯化过程中配基脱落的复合物去除方法，其特征在于，所述步骤1)中的目标细胞为293细胞。

3.根据权利要求1所述的一种抗体纯化过程中配基脱落的复合物去除方法，其特征在于，所述步骤3)中去除残余蛋白的方式为离子交换或氧化还原。

4.根据权利要求1所述的一种抗体纯化过程中配基脱落的复合物去除方法，其特征在于，所述步骤4)中的亲和柱为预活化的琼脂糖骨架或葡聚糖骨架。

5.根据权利要求1所述的一种抗体纯化过程中配基脱落的复合物去除方法，其特征在于，所述步骤4)中，测试亲和柱耐受的pH范围、盐离子种类和酸碱性能，筛选出最佳的偶联方式。