[发明专利]一种从山橿中提取银松素的提取方法及其应用

说明书

本发明涉及从山橿中提取银松素的提取方法及其应用，可有效解决幽门螺杆菌的治疗用药问题，其解决的技术方案是，提取方法包括以下步骤：1）提取山橿提取物溶液；2）提取山橿总黄酮部位；3）提取银松素；本发明为探索山橿中发挥抑制幽门螺杆菌的有效成分，分离提取得到山橿中主要的化合物，并进行抑菌实验，得到对幽门螺杆菌有较好抑制作用的活性成分银松素，是从山橿中提取银松素的提取方法及其应用上的创新。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，特别是一种从山橿中提取银松素的提取方法及其应用。

背景技术

山橿(Lindera reflexa Hemsl.)，系樟科(Lauraceae)山胡椒属植物，落叶灌木或小乔木，常生长于山坡林下或灌丛中，在河南大别山地区、湖北、湖南、安徽、江西、贵州、浙江等地均有分布。山橿在河南民间有悠久的使用历史，常用于治疗慢性胃炎、胃溃疡等胃部疾病，并被收载于《河南省中药材标准》(1993年版)。目前对山橿的研究主要有化学成分的分离提取、有效成分的筛选及药理活性研究等，其中发现了山橿总黄酮是其主要的活性部位，具有镇痛、抗炎、抗氧化等作用。

幽门螺杆菌为革兰氏阴性螺旋状细菌，1982年澳大利亚学者Barry Marshall和Robin Warren首先在人体胃中发现了这种细菌，此后人们对幽门螺杆菌进行了长达几十年的研究，它是目前人类发现在胃中存活的唯一微生物种类，世界卫生组织在1994年把幽门螺杆菌定为Ⅰ类致癌因子，并且在全球内约有50％的人感染了幽门螺杆菌，由于抗生素的滥用，单独的抗生素类药物如克拉霉素、甲硝唑等已不能根除胃中的幽门螺杆菌，荟萃分析结果显示，我国标准三联方案(质子泵抑制剂加两种抗生素)的幽门螺杆菌根除率已低于80％，现常用四联疗法(质子泵抑制剂加两种抗生素和铋剂)来治疗幽门螺杆菌。随着幽门螺杆菌对抗生素耐药性的逐年增加，现寻找新的安全有效的抗幽门螺杆菌药物具有重大意义。

实验发现山橿对幽门螺杆菌有一定的抑制作用，但是仅局限于石油醚部位、水部位、生物碱部位、正丁醇部位等粗分的部位，并未对有效的活性成分进行筛选，所以对发挥抑制作用的成分暂不明确，有待研究的发现，探明山橿发挥疗效的关键成分，以及如何将山橿的药用价值发挥到最大，同时为治疗幽门螺杆菌提供新的治疗方案，是本领域技术人所关心的主要问题。

发明内容

针对上述情况，为解决现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种从山橿中提取银松素的提取方法及其应用，可有效解决幽门螺杆菌的治疗用药问题。

本发明解决的技术方案是，银松素(反-3,5-二羟基二苯乙烯)的结构式为：

提取方法包括以下步骤：

1)提取山橿提取物溶液

取粉碎的山橿药材，分别以山橿12倍量的体积浓度为70％乙醇超声提取3次，每次1h，合并三次提取液，减压浓缩得浓缩液，浓缩液加水稀释成相当于每1mL含生药0.05mg(0.05mg/mL生药)的山橿提取物溶液，备用；

2)提取山橿总黄酮部位

用体积浓度95％乙醇浸泡大孔吸附树脂过夜，再使用蒸馏水梯度洗脱至无醇味后，湿法装柱，取山橿提取物溶液进行装柱，首先使用蒸馏水洗脱杂质，再使用4倍量大孔吸附树脂体积，浓度70％的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩并干燥得到山橿总黄酮部位；

3)提取银松素

取干燥的山橿总黄酮部位0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇100ml，称定重量，超声10min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，续滤液装柱，即得。