[发明专利]一种托吡司特中两个基因毒性杂质的分离和测定方法

权利要求书

1.一种托吡司特中两个基因毒性杂质的分离和测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）取托吡司特适量，置于容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释，作为供试品溶液；分别取TP02-IMP-A和TP-IMP-A对照品适量，置于容量瓶中，用稀释剂溶解并稀释，作为对照品溶液；

（2）精密量取供试品溶液和对照品溶液各50μL，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图；

（3）分别取托吡司特、TP02-IMP-A和TP-IMP-A对照品各适量，置于容量瓶中，用稀释剂溶解并稀释，作为系统适用性溶液；

（4）精密量取50μL系统适用性溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，相邻色谱峰之间的分离度应不小于1.5。

2.根据权利要求1所述的一种托吡司特中两个基因毒性杂质的分离和测定方法，其特征在于，所述稀释剂为磷酸与乙腈的混合液，其中：磷酸的质量百分含量为1%，磷酸与乙腈的体积比为90:10。

3.根据权利要求1所述的一种托吡司特中两个基因毒性杂质的分离和测定方法，其特征在于，高效液相色谱仪测定时采用梯度洗脱。

4.根据权利要求3所述的一种托吡司特中两个基因毒性杂质的分离和测定方法，其特征在于，流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为1%磷酸，所述流动相B为乙腈。

5.根据权利要求3所述的一种托吡司特中两个基因毒性杂质的分离和测定方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序如下表所示：

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6.根据权利要1所述的一种托吡司特中两个基因毒性杂质的分离和测定方法，其特征在于，杂质的检测限度为：按照外标法计算，托吡司特中TP02-IMP-A和TP-IMP-A的含量均不得大于10ppm。

7.根据权利要1所述的一种托吡司特中两个基因毒性杂质的分离和测定方法，其特征在于，所述色谱柱的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；色谱柱的柱长为100至300mm，优选为250mm；直径为2至10mm，优选为4.6mm；填料粒径为2至10μm，优选为5μm。

8.根据权利要1所述的一种托吡司特中两个基因毒性杂质的分离和测定方法，其特征在于，经过所述色谱柱的流速为0.5至1.5mL/mim，优选为1.0 mL/mim；进样体积为10至50μL，优选为20μL；所述色谱柱柱温为20至40℃，优选为30℃。

9.根据权利要1所述的一种托吡司特中两个基因毒性杂质的分离和测定方法，其特征在于，所述分析测定采用的检测器选自紫外检测器、二极管阵列检测器或者质谱检测器。

10.根据权利要1所述的一种托吡司特中两个基因毒性杂质的分离和测定方法，其特征在于，所述紫外检测器、二极管阵列检测器或者质谱检测器的检测波长为180至320nm，优选为220nm。