[发明专利]一种液相色谱串联质谱法同时检测保健食品中雄激素化合物的方法

权利要求书

1.一种液相色谱串联质谱法同时检测保健食品中雄激素化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：所述的雄激素化合物为1,4-雄烯二酮、17α-群勃龙、群勃龙、雄烯二酮、诺龙、勃地酮、17α-勃地酮、睾酮、甲睾酮和司坦唑醇；

(1)提取：

口服液：量取1mL待测口服液于离心管中，加入1μg/mL的同位素内标混合溶液50μL，加乙腈9mL，超声混合10-15min；

片剂、胶囊：称取1g试样于离心管中，加入1μg/mL的同位素内标混合溶液50μL，加乙腈10mL，超声混合10-15min；

所述同位素内标混合溶液为含有相同体积比的睾丸酮-D3和康力龙-D3混合液；

(2)涡旋离心萃取：样品液涡旋混合后离心，取上层乙腈溶液，加热氮吹浓缩，加乙腈定容；所述涡旋离心萃取过程：涡旋振荡10-15min，在4℃-10℃下8000-10000r/min离心10-15min，取上层乙腈溶液于另一个试管中，在25℃-40℃水浴中氮吹后用乙腈定容至1mL；

(3)液相色谱串联质谱检测：定容后的溶液经有机滤膜过滤后，进行液相色谱串联质谱检测，绘制标准工作曲线，内标法定量，根据峰面积计算待测样品中雄激素的浓度；

色谱条件为：采用X Bridge C₁₈柱分离，X Bridge C₁₈柱为150mm×2.1mm，5μm，流动相：A相0.1％甲酸乙腈；B相：0.1％甲酸水；柱温25℃，进样体积10μL，流速0.2mL/min；梯度洗脱：0～15min，90％B～0％B；15min～20min，0％B；20min～21min，0％B～90％B；21min～31min，90％B；

质谱条件为：ESI⁺电离模式；检测方式：多反应监测MRM；鞘气：40Unit；辅助气：10Unit；蒸发器温度：250℃；毛细管温度：350℃；电喷雾电压：2500V；

所述多反应监测MRM的参数为：

。

2.根据权利要求1所述液相色谱串联质谱法同时检测水产品中雄激素化合物的方法，其特征在于，步骤(1)所述同位素内标混合溶液为含有相同体积比的睾丸酮-D3和康力龙-D3混合液，加甲醇-水混合溶液定容，其中，甲醇与水体积比为1：1。