[发明专利]基于通心络预处理的间充质干细胞来源外泌体及其制备方法

权利要求书

1.一种上调miR-146a的表达水平的间充质干细胞来源外泌体的制备方法，该方法包括：采用通心络预处理间充质干细胞，并培养处理后的间充质干细胞以收集其分泌的外泌体。

2.根据权利要求1所述的方法，该方法包括：

在间充质干细胞的培养基中加入通心络预处理间充质干细胞12-24小时后，更换细胞培养基为无外泌体的完全培养基继续培养；48小时后收集条件培养基并利用超速离心法分离得到经通心络预处理间充质干细胞分泌的外泌体。

3.根据权利要求2所述的方法，其中，通心络预处理间充质干细胞的时间为24h。

4.根据权利要求2所述的方法，其中，超速离心法包括：

收集条件培养基后，依次离心去除细胞、离心去除细胞碎片、离心去除大囊泡，然后离心收取沉淀并重悬后，再次离心获得外泌体。

5.根据权利要求4所述的方法，其中，收集条件培养基后，300g离心10min去除细胞；2000g离心20min去除细胞碎片；16500g高速离心30min去除大囊泡；120000g超速离心70min收取沉淀并重悬后，再次120000g超速离心70min获得外泌体。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中，所述间充质干细胞包括骨髓间充质干细胞或脂肪间充质干细胞。

7.通心络在制备促进间充质干细胞分泌高表达miR-146a并且具有改善心梗后心功能、减少梗死面积、减少心肌细胞凋亡及减轻炎症的外泌体的制剂中的应用。

8. 根据权利要求7所述的应用，其中，利用400 μg/mL通心络加入间充质干细胞的IMDM培养基中预处理12-24小时。

9.根据权利要求7或8所述的应用，其中，所述间充质干细胞包括骨髓间充质干细胞或脂肪间充质干细胞。