[发明专利]多肽序列及其应用

说明书

本发明公开了一种多肽序列及其应用，包括：N端的胆碱结合序列以及C端的特异性抗原表位序列；其中，所述N端为ChBp序列中具有胆碱结合活性的部分；所述C端为流感病毒表面蛋白血凝素HA的抗原表位。本多肽序列N端的氨基酸序列具有肺炎链球菌结合活性，C端具有流感抗原特性，该多肽序列在流感抗体存在时能够诱导流感抗体结合，进而降低肺炎链球菌的生长速率、对细胞表面的粘附以及自溶；在小鼠体内多肽与流感抗体的共同存在能够降低肺炎链球菌的定殖。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，特别涉及一种多肽序列及其应用。

背景技术

肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)是引起社区获得性肺炎、支气管炎、鼻窦炎、中耳炎、败血症以及脑膜炎等疾病的一种重要病原体。据世界卫生组织(WHO)统计，全球每年超过160万人死于肺炎链球菌感染。肺炎链球菌是一种条件致病菌，它能够无症状定植在人类鼻腔中，健康成年人上呼吸道中肺炎链球菌携带率约为5％-10％，2岁以下婴幼儿携带率约在22-45％之间。在机体免疫力降低或受到其他病原体感染后，肺炎链球菌可能转变为增殖状态导致机体疾病的发生或症状加重。其中流感病毒(IAV)感染是诱发肺炎链球菌继发感染的一个重要因素，感染流感病毒后患者发生肺炎球菌感染所致肺炎的易感性增加，据统计在2009-2010年H1N1流行期间4岁以下儿童肺炎链球菌的血液感染率约增加了15倍，并且肺炎链球菌混合流感病毒感染使得患者的致死率大大升高。

研究表明流感病毒感染所致的发热和胞外三磷酸腺苷(ATP)增多能够增强肺炎链球菌的代谢能力和毒力表型。其他一些因素也被证实对肺炎链球菌的继发感染具有促进作用，如流感病毒感染所致的白介素I的升高以及呼吸道纤毛运动能力降低导致的对肺炎链球菌自然清除能力的降低等。另一方面由于肺炎链球菌具有荚膜，荚膜的存在能够阻碍补体介导的吞噬作用。因此在流感病毒感染所致的炎症的反应的下，肺炎链球菌能够增殖进而增强炎症反应，导致患者病情的加重。此外由于肺炎链球菌血清型众多，以及耐药菌株的流行增加了肺炎链球菌感染的治疗难度。因此，在流感病毒感染后，抑制肺炎链球菌感染和增殖的药物，可能作为防止患者病情加重一种预防措施。

肺炎链球菌菌体细胞壁的特征是在磷壁酸的N-乙酰半乳糖胺分子上连接了磷酰胆碱。胆碱的存在对肺炎链球菌的生长很重要，在不含胆碱的培养基中其生长受到抑制，在含有胆碱类似物(乙醇胺)的培养基中生长的菌体表现出减弱的致病性。肺炎链球菌编码多种胆碱结合蛋白，这些胆碱结合蛋白具有胆碱结合重复序列(Choline Binding Repeats，CBR)，CBR具有与胆碱结合的活性。此前我们已经设计了一种具有与肺炎链球菌特异性结合，并具有抑菌功能的CBR的模拟序列。在肺炎链球菌编码的胆碱结合蛋白中，LytA是一种主要的自溶酶，在菌体生长受限或受到机体免疫压力时，LytA能够诱导菌体自溶。菌体自溶时能够释放多种毒力蛋白，导致严重的炎症反应；另一方面细胞壁的自溶会消耗大量机体产生的抗体，能够介导菌体的免疫逃避。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种多肽序列，通过在具有胆碱结合能力的多肽序列(ChBp)的C端添加流感病毒血凝素HA的抗原表位序列，使得合成的多肽序列ChBp-IAV具有与肺炎链球菌的结合能力，且在流感病毒抗体存在时，ChBp-IAV能够降低肺炎链球菌的粘附性，并诱导流感抗体以及补体对肺炎链球菌的结合，同时小鼠体内存在流感抗体时，ChBp-IAV的存在能够减少肺炎链球菌的定殖并增强对肺炎链球菌的清除能力。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种多肽序列，包括：

N端的胆碱结合序列以及C端的特异性抗原表位序列；

其中，所述N端为ChBp序列中具有胆碱结合活性的部分；所述C端为流感病毒表面蛋白血凝素HA的抗原表位。