[发明专利]一种美国白蛾不同种群密度的荧光定量内参基因及其引物和应用有效
| 申请号: | 202110544686.0 | 申请日: | 2021-05-19 |
| 公开(公告)号: | CN113151505B | 公开(公告)日: | 2021-12-28 |
| 发明(设计)人: | 赵旭东;陈瑾;郝德君;耿薏舒;乔恒;王璟廷 | 申请(专利权)人: | 南京林业大学 |
| 主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6851;C12N15/11;C12N15/12 |
| 代理公司: | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人: | 戴嵩玮 |
| 地址: | 210037 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 美国 不同 种群 密度 荧光 定量 内参 基因 及其 引物 应用 | ||
1.用于扩增美国白蛾不同种群密度的荧光定量内参基因的引物或荧光定量检测试剂盒在荧光定量检测不同种群密度下的美国白蛾功能基因中的应用;
所述引物包括扩增RPS26基因用引物和/或扩增RPS15基因用引物;
所述扩增RPS26基因用引物包括核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示的反向引物;
所述扩增RPS15基因用引物包括核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示的反向引物;
所述荧光定量检测试剂盒包括所述引物。
2.根据权利要求1所述应用,其特征在于,所述美国白蛾的种群密度包括1~15头/100ml。
3.根据权利要求1所述应用,其特征在于,所述功能基因的荧光定量检测的反应条件为95℃预变性30s;95℃5s,60℃34s,40个循环。
4.根据权利要求1所述应用,其特征在于,所述功能基因的荧光定量检测的反应体系为20.0μL,包括SYBR Premix Ex-Taq 10.0μL,10mM正向引物1.0μL,10mM反向引物1.0μL,100ng/μL cDNA 2.0μL,无RNA酶的ddH2O 6.0μL。
5.根据权利要求1~4任意一项所述应用,其特征在于,所述功能基因包括丝氨酸蛋白酶基因HcSP2。
6.根据权利要求5所述应用,其特征在于,所述丝氨酸蛋白酶基因HcSP2的扩增用引物为核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO:8所示的反向引物。
7.根据权利要求1所述应用,其特征在于,所述荧光定量检测试剂盒还包括SYBRPremix Ex Taq。
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