[发明专利]一种检测泛素结合酶抗体的试剂盒及使用方法

权利要求书

1.一种检测泛素结合酶抗体的试剂盒，其特征在于，包括：用于检测泛素结合酶抗体的溶液；所述溶液包含用于标记泛素结合酶抗原蛋白的活性酯、泛素结合酶抗原蛋白和非放射性溶液。

2.根据权利要求1所述的检测泛素结合酶抗体的试剂盒，其特征在于，所述活性酯包括硫代钌衍生物活性酯和生物素聚乙二醇活性酯。

3.根据权利要求2所述的检测泛素结合酶抗体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括96孔平板、链霉亲和素石墨烯平板、PBS溶液、BSA溶液、PBST溶液和Block-A溶液。

4.根据权利要求3所述的检测泛素结合酶抗体的试剂盒，其特征在于，所述PBS溶液为1×PBS溶液。

5.根据权利要求3所述的检测泛素结合酶抗体的试剂盒，其特征在于，所述BSA溶液的浓度为5％。

6.根据权利要求3所述的检测泛素结合酶抗体的试剂盒，其特征在于，Block-A溶液的浓度为3％。

7.根据权利要求3所述的检测泛素结合酶抗体的试剂盒，其特征在于，所述链霉亲和素石墨烯平板为链霉素标记的MSD96孔板。

8.一种检测泛素结合酶抗体的制剂在用于检测存在T1DM的受试者的方法中使用的试剂中的应用，其特征在于，所述方法包括：

使用硫代钌衍生物活性酯和生物素聚乙二醇活性酯分别标记重组的泛素结合酶的抗原蛋白；

将标记后的泛素结合酶的抗原蛋白加入5％BSA的溶液进行稀释；

将96孔平板的每孔依次加入16μl的1×PBS溶液、4μl待测血清和稀释后的溶液，并将96孔平板中的混合溶液搅拌均匀；

将96孔平板放置在振荡器中低速振荡1h，振荡结束后将96孔平板在4℃的环境中储存6-12小时；

将装有150μl/孔的3％Block-A溶液的MSD96孔板在4℃的环境中储存6-12小时；将储存后的MSD96孔板使用150μl的PBST缓冲液洗涤3次；

将96孔平板中的混合溶液转移至MSD96孔板中，将装有混合溶液的MSD96孔板避光放置在在振荡器中低速振荡1h；

将振荡结束后的MSD96孔板使用150μl的PBST缓冲液洗涤3次，洗涤结束后将MSD96孔板加入150μl/孔的Reading buffer溶液于MSD计数仪上进行计数；

根据MSD计数仪的输出结果计算泛素结合酶抗体的抗体指数。