[发明专利]一种低分子量鲟鱼软骨多糖及其制备方法有效
| 申请号: | 202110512982.2 | 申请日: | 2021-05-11 |
| 公开(公告)号: | CN113293186B | 公开(公告)日: | 2022-04-19 |
| 发明(设计)人: | 李平兰;武瑞赟;尚楠;康慎敏 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
| 主分类号: | C12P19/26 | 分类号: | C12P19/26;C08B37/08;A61K31/715;A61K35/60;A61P35/00 |
| 代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 商秀玲 |
| 地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 分子量 鲟鱼 软骨 多糖 及其 制备 方法 | ||
1.一种低分子量鲟鱼软骨多糖的制备方法,其特征在于,包括:
将鲟鱼软骨经第一次酶解得到分子量大于10000Da的高分子量软骨多糖,
将所述高分子量软骨多糖经过氧化氢溶液处理后,再经第二次酶解得到分子量小于5000Da的低分子量软骨多糖,
所述第一次酶解使用的酶为硫酸软骨素专用提取酶,所述第二次酶解使用的酶为硫酸软骨素AC酶;
所述第一次酶解中,硫酸软骨素专用提取酶的用量为15-25mg硫酸软骨素专用提取酶/g鲟鱼软骨;酶解条件为:pH6-8、58-60℃条件下酶解4-5h;
在所述第一次酶解后,将酶解产物与三氯乙酸混合后,去除蛋白质并得到滤液,再采用无水乙醇沉淀所述滤液,收集沉淀物;对所述沉淀物进行盐析后再用无水乙醇沉淀,分离沉淀物中的所述高分子量软骨多糖;
所述过氧化氢溶液的浓度为2-4%;所述过氧化氢溶液处理为:将所述高分子量的软骨多糖按照质量体积比g:mL为(1-3):10与所述过氧化氢溶液混合,于32-37℃处理1-2h,再于65-75℃加热处理8-12min;
所述第二次酶解中,硫酸软骨素AC酶的用量为0.05-0.15IU/mg底物;底物溶液的浓度为0.5-2mg/mL;酶解条件为:pH5-7、34-38℃条件下酶解80-90min;
在所述第二次酶解后,将酶解产物经无水乙醇沉淀10-14h,收集沉淀物,分离沉淀物中的所述低分子量软骨多糖。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述鲟鱼软骨的制备包括:将鲟鱼去头刨片后,经75-80℃高温水煮15-25min后,剔除鲟鱼肉得到鲟鱼软骨。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,将所述鲟鱼软骨经无水乙醇浸泡后,冻干得到鲟鱼软骨粉。
4.权利要求1~3任一项所述的制备方法在制备抗结直肠肿瘤的产品中的应用。
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