[发明专利]猪肌肉及肾脏组织中糖草酯及磺草酮残留量的定量测定方法

权利要求书

1.猪肌肉及肾脏组织中糖草酯及磺草酮残留量的定量测定方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

步骤一：样品的提取，取代表性样品，经组织绞碎机粉碎均匀，装入洁净容器内密封，标明标记；称取试样于离心管中，加入水进行浸润，加入20～25mL酸化乙腈，超声提取，加入无水硫酸钠，涡旋，离心处理后取下层清液；

步骤二：样品的净化，准确吸取步骤一所述下层清液于刻度离心管中，加入净化试剂，涡旋，离心并静置，吸取上清液过微孔滤膜，待LC-MS/MS测定；

步骤三：绘制工作曲线，取经检测不含糖草酯及磺草酮的猪肌肉和肾脏组织作为空白试样，在其中加入3～5份不同浓度的糖草酯及磺草酮，按照上述步骤一和步骤二进行提取样品净化液供LC-MS/MS测定；

重复三次后将所得峰面积与对应浓度做线性回归，以峰面积为纵坐标，对应浓度为横坐标绘制工作曲线并计算出糖草酯及磺草酮在猪肌肉和肾脏组织的回归方程和相关系数；

步骤四：实际样品测定和结果计算，采集待测定猪肌肉和猪肾脏组织，并将猪肌肉和猪肾脏组织按照步骤一和步骤二进行提取和LC-MS/MS检测，记录色谱图和峰面积，并以步骤三中所得的线性方程分别进行数据处理，计算出采集的猪肌肉和肾脏组织糖草酯及磺草酮的含量。

2.根据权利要求1所述的猪肌肉及肾脏组织中糖草酯及磺草酮残留量的定量测定方法，其特征在于，LC-MS/MS检测方法的液相条件为：色谱柱：Eclipse C18，100mm×2.1mm，1.7μm；流速：0.25mL/min；柱温：30℃；进样量：10μL；流动相：乙腈(A)和添加10mmol乙酸铵和0.1％甲酸水溶液(B)，梯度洗脱条件如下：

时间(min)	流动相A(％)	流动相B(％)，体积分数
0.0	20	80
1	20	80
5	100	0
7	100	0
8	10	90

LC-MS/MS检测方法的质谱条件为：电喷雾质谱检测；多反应监测(MRM)正离子扫描模式；电喷雾电压4000V；雾化气压力40psi；离子源温度350℃；毛细管电压为120～150V；碰撞能量为15eV；糖草酯的母离子为428.2～429.2，子离子分别为84.6～85.6和298.3～299.3；磺草酮的母离子为328.2～329.2，子离子分别为110.4～111.4和138.3～139.3。