[发明专利]一种鸭腺病毒3型菌株、鸭腺病毒卵黄抗体及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种鸭腺病毒3型菌株、鸭腺病毒卵黄抗体及其制备方法和应用。该鸭腺病毒3型菌株为鸭腺病毒3型YJ株，于2020年11月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.21093；该鸭腺病毒3型YJ株HEXON基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明分离得到了腺病毒3型YJ株，并制备得到了能够用于治疗鸭腺病毒3型病毒，高效安全，无毒副作用的卵黄抗体。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种鸭腺病毒3型菌株、鸭腺病毒卵黄抗体及其制备方法和应用。

背景技术

腺病毒为线状双股DNA病毒，无囊膜，直径70～110nm，呈二十面体对称。腺病毒粒子由252个壳粒组成，包含240个不在顶点的壳粒(六邻体)和12个顶点壳粒(五邻体)。每个五邻体基底带有1～2根被称为纤丝的纤突，纤丝的长度与病毒的抗原性相关。感染禽类的腺病毒主要有3个群，I群代表株是鸡胚致死性孤儿病毒，目前从鸡分离到12个血清型，火鸡2个血清型，鹅4个血清型，鸭3个血清型；Ⅱ群主要包括火鸡出血性肠炎病毒、大理石脾病毒和鸡大脾病病毒；Ⅲ群与减蛋综合征相关，目前只包含一个成员，即减蛋综合征病毒。

鸭腺病毒l型病毒是与产蛋下降综合症相关的一种无囊膜的双股DNA禽腺病毒，属于腺胸腺病毒属，与I群禽腺病毒存在很小的共同抗原。发病鸭产蛋率大幅度下降。少数发病鸭采食量减少，精神轻度沉郁，产出畸形蛋、软壳蛋，死亡率为1％～5％。鸭腺病毒2型自法国番鸭中爆发的大规模疾病中分离，该病毒能产生腺病毒抗体。使感染病鸭体重下降，有些站不稳。感染鸭从35日龄左右开始持续10d每天都有1～1.5％的死亡率。鸭3型腺病毒从2014年在我国首次分离，该病毒hexon基因推导的氨基酸序列与鸭2型腺病毒GR株同源性仅为60％。

目前对于腺病毒3型的防控没有特别有效的手段，卵黄抗体可用于畜禽特异性疫病的治疗和预防，尤其是对病毒性疾病的特异性治疗作用，是一种方便、高效、无毒副作用的非抗生素生物禽药，在临床上得到广泛的认同和应用，同时还能避免疫苗可能带来的病毒污染。市场上还未见商品化的卵黄抗体类产品，因此迫切需要一种可用于防治及治疗腺病毒3型病毒的卵黄抗体类产品。

发明内容

针对现有技术中的上述不足，本发明提供一种鸭腺病毒3型菌株、鸭腺病毒卵黄抗体及其制备方法和应用，本申请分离得到了腺病毒3型YJ株，并制备得到了能够用于治疗鸭腺病毒3型病毒的卵黄抗体。

为实现上述目的，本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种鸭腺病毒3型菌株，该鸭腺病毒3型菌株为鸭腺病毒3型YJ株，于2020年11月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCCNo.21093。

进一步地，鸭腺病毒3型YJ株HEXON基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

一种鸭腺病毒卵黄抗体的制备方法，包括以下步骤：

(1)对权利要求1所述的鸭腺病毒3型YJ株菌株进行灭活，然后对产蛋鸡进行免疫；

(2)经步骤(1)免疫的产蛋鸡鸡蛋鸭腺病毒病毒卵黄中和抗体效价≥1:512时，收集鸡蛋，并保存于湿度为30～60％，温度为10～15℃的避光环境中；

(3)将蛋壳有粪污的高免鸡蛋单独挑出，用自来水清洗干净，与蛋壳洁净的高免鸡蛋一起摆入塑料蛋盘中，浸入40℃的0.1％苯扎溴铵水溶液中15min，而后在95℃自来水中浸泡5s；

(4)手工或机械打蛋，除去蛋清、胚盘和系带，收集卵黄；

(5)稀释：卵黄转入反应罐中，搅拌呈膏状，加入与卵黄等体积的注射用水(25℃左右)，搅拌均匀。