[发明专利]一种鸭腺病毒3型菌株、鸭腺病毒卵黄抗体及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 202110468521.X 申请日: 2021-04-28
公开(公告)号: CN113278595B 公开(公告)日: 2023-05-09
发明(设计)人: 李来旭;李睿;刘鑫莹;何鸿章;张强;周宇;明月月;李阁;张晏;胡芸 申请(专利权)人: 重庆永健生物技术有限责任公司
主分类号: C12N7/00 分类号: C12N7/00;C07K16/08;A61K39/395;A61P31/20
代理公司: 北京正华智诚专利代理事务所(普通合伙) 11870 代理人: 李林合
地址: 402473 重庆市*** 国省代码: 重庆;50
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摘要:
搜索关键词: 一种 病毒 菌株 卵黄 抗体 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种鸭腺病毒(Duck adenovirus)3型菌株,其特征在于,该鸭腺病毒3型菌株为鸭腺病毒3型YJ株,于2020年11月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏编号为CGMCC No.21093。

2.一种鸭腺病毒卵黄抗体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)对权利要求1所述的鸭腺病毒3型YJ株菌株进行灭活,然后对产蛋鸡进行免疫;

(2)经步骤(1)免疫的产蛋鸡鸡蛋鸭腺病毒卵黄中和抗体效价≥1:512时,收集鸡蛋,并保存于湿度为30~60%,温度为10~15℃的避光环境中;

(3)对收集的鸡蛋进行消毒并提取其中的卵黄,将其搅拌至呈膏状,再加入与卵黄等体积的注射用水后搅拌均匀;

(4)加入7~10倍原卵黄体积,pH值为5~6的酸化水,搅拌均匀后降温至2~4℃后,再静置12~15小时;

(5)吸取上清液,加入终浓度为1.0%的辛酸,搅拌均匀,于室温作用4~6小时后,收集80~90%下层液,然后过滤并收集滤液;

(6)将步骤(5)剩余物搅拌均匀,用连续管式离心机离心,收集离心液,合并滤液和离心液;

(7)调节步骤(6)所得产物pH值为5.5~7.5,过滤除菌后浓缩灭活即可。

3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述免疫过程为:

S1.基础免疫:鸡皮下注射免疫抗原1.0mL/只;

S2.加强免疫:基础免疫后14日,鸡皮下注射免疫抗原2.0mL/只;

S3.强化免疫:加强免疫后21日,鸡皮下注射免疫抗原2.0mL/只;

S4.维持免疫:当高免鸡蛋的鸭腺病毒3型YJ株菌株卵黄中和抗体效价临界1:512时,维持接种1次,鸡皮下注射免疫抗原2.0mL/只。

4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述消毒的过程为:

将鸡蛋置于40~50℃,0.1~0.5%的苯扎溴氨水溶液中浸泡15~20min,然后再于90~95℃水中浸泡2~5s。

5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤(7)中所述灭活的过程为:加入终浓度为0.05%的甲醛溶液,甲醛溶液中HCHO含量为37.0~40.0%,搅拌均匀,室温条件20~25℃下灭活24小时。

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