[发明专利]水稻土中土著耐Cd细菌及其筛选与鉴定

权利要求书

1.一种水稻土中土著耐Cd细菌，其特征在于：所述的水稻土中土著耐Cd细菌分类命名为Escherichia coli strain RR1(CP011113)，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，微生物保藏号为CGMCC NO.21603，保藏日期：2021年01月08日，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学微生物研究所。

2.权利要求1所述的一种水稻土中土著耐Cd细菌，其特征在于，所述的水稻土中土著耐Cd细菌的16S rRNA序列如SEQ ID NO:1所示。

3.权利要求1所述的一种水稻土中土著耐Cd细菌的筛选与鉴定，其特征在于，具有以下步骤,

S1设置实验用水稻盆栽：取未经认为干扰的自然生态系统土壤，风干后研磨过筛，混匀后用于盆栽实验；

S2水稻土理化性质测定：测定水稻土含水量、pH值、无机氮NH₄⁺-N与NO₃^--N的浓度、TN、TOC、TP、淹水期水稻土Eh和DO；

S3稀释分离法分离微生物：成熟期破坏性采集水稻根系土样，称取不同水稻土样品，依次进行10倍系列稀释，将稀释液接种到LB固体培养基进行好氧培养；

S4微生物耐Cd特性试验：挑取S3中生长良好的菌落接种到对应培养基中，继续培养，按此方法将培养基Cd浓度依次提升，筛选具有较强Cd耐受能力的菌株；

S5克隆测序鉴定:对分离纯化的具有较强Cd耐受能力的菌株进行DNA提取，进行PCR扩增；PCR扩增产物采用琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增特异性，将16S rRNA基因PCR扩增产物送基因测序公司进行克隆测序。