[发明专利]一种利用大豆肽聚集体与EGCG结合制备纳米颗粒的方法

权利要求书

1.一种利用大豆肽聚集体与EGCG结合制备纳米颗粒的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将大豆磨粉过60目筛，与正己烷混合(1：3)进行三次脱脂得到脱脂豆粉。将脱脂豆粉溶于去离子水中(1：10，w/w)，并用2mol/L NaOH调节pH至8.0。所得浆液在45℃条件下连续搅拌2h，并在10000g离心30min后收集上清液。用2mol/L HCl调节上清液pH至4.5沉淀蛋白质，然后在6500g下离心20min收集沉淀。将得到的沉淀水洗三次，并用2mol/L NaOH调节pH至中性后冷冻干燥得到大豆分离蛋白粉末。

(2)将冻干大豆分离蛋白(SPI)粉末溶于去离子水中(4％，w/v)，于50℃下加热搅拌20min以达到碱性蛋白酶的最适温度。在SPI溶液中加入碱性蛋白酶(1％,v/w)持续酶解20min-3h，并在酶解过程中用2M NaOH始终保持SPI溶液的pH为8.5。将酶解后的混合物调节pH至中性，进行离心，将含有大部分大豆肽聚集体酶解物(SPHs)的上清液分离，取沉淀冻干得到肽聚集体(SPA)；

(3)将冻干后得到的肽聚集体(SPA)溶于去离子水中(1％，w/v)，搅拌2h，水化过夜，调节PH 7.0。将浓度为0.02％的EGCG加入到水解后的聚集体中室温避光磁力搅拌2h后，在水浴状态下，在300-900w超声0-30min得到复合纳米颗粒。

2.根据权利要求1所述的一种利用大豆肽聚集体与EGCG结合制备纳米颗粒的方法，其特征在于：在SPI溶液中加入碱性蛋白酶酶解的时间为3h。

3.根据权利要求1所述的一种利用大豆肽聚集体与EGCG结合制备纳米颗粒的方法，其特征在于：在制备纳米复合颗粒时所用的超声强度为900w，进行超声的时间为10min。