[发明专利]一种基于Au@Pt酶的免疫层析试纸条及其制备方法

权利要求书

1.一种基于Au@Pt的侧流免疫层析试纸条制备方法,其特征在于，包括以下步骤：

S1：制备Au@Pt标记单克隆抗体的溶液，Au@Pt标记单克隆抗体为Au@Pt-mAb；

S2:在硝酸纤维素膜上制备检测线T线和控制线C线；

S3:将S2中的硝酸纤维素膜与样品垫玻、结合垫和吸水垫组装成整条试纸，然后将组装好的试纸切成试纸条。

2.根据权利要求1所述的基于Au@Pt的侧流免疫层析试纸条制备方法,其特征在于，步骤S1包括：

S11先制备Au@Pt纳米酶溶液；

S12取两个离心管，分别加入1mLS101中制备的Au@Pt纳米酶溶液，然后0.2mol/L的K₂CO₃溶液调节胶体金溶液至pH 8.5左右；

S13在两个离心管中分别加入1.3μL 1mg/mL的DON单克隆抗体、2.3μL 0.5mg/mL的ZEN单克隆抗体，室温下反应30min，使抗体标记在胶体金颗粒上；

S14向离心管中各加入牛血清白蛋白溶液，封闭30min，离心去除上清液；

S15将S104中获得的沉淀液重溶于Tris缓冲液，分别得到稳定的Au@Pt标记的DON单克隆抗体和Au@Pt标记的ZEN单克隆抗体。

3.根据权利要求2所述的基于Au@Pt的侧流免疫层析试纸条制备方法,其特征在于，步骤S11制备Au@Pt纳米酶溶液的步骤包括：

S111取3mL的K₂PtCl₆和3mL的HAuCl₄·4H₂O于酸化后的玻璃瓶中,称取0.06g的PluronicF127加入混合溶液中，并超声溶解；

S112在超声状态下加入6mL的抗坏血酸，继续超声反应15min,超声完成后置于磁力搅拌器上，室温搅拌20-24h；

S113将获得的产物10000rpm下离心20min，除去多余的Pluronic F127，并加入丙酮和水进行反复洗涤，洗涤4次，最后加入双蒸水并超声分散，获得Au@Pt纳米酶溶液。

4.根据权利要求1所述的基于Au@Pt的侧流免疫层析试纸条制备方法,其特征在于，步骤S2中硝酸纤维素膜的处理方法包括：

S201用PBS稀释的分析物包被原和羊抗鼠二抗分别作为检测线T线和控制线C线，喷在硝酸纤维素膜上，两条线的间距为5mm；

S202将硝酸纤维素膜在60℃下干燥5小时。

5.一种权利要求1-4任一项所述的基于Au@Pt的侧流免疫层析试纸条制备方法获得的试纸条。

6.根据权利要求5所述的试纸条，其特征在于，所述试纸条包括底板，所述底板上设有硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上设有检测线T线和控制线C线；

所述硝酸纤维素膜的一端设有结合垫，所述结合垫上设有样品垫玻；所述硝酸纤维素膜的另一端设有吸水垫。

7.权利要求5所述的试纸条在检测谷物粮食及环境水体中毒素的应用。

8.根据权利要求7的应用，其特征在于，所述毒素包括呕吐毒素和玉米赤霉烯酮。