[发明专利]一种获得完整植物叶脉的方法

权利要求书

1.一种获得完整植物叶脉的方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一：按体积比96:4~94:6取无水乙醇和冰醋酸配制成固定保存液A；

步骤二：将采集的植物叶片用清水洗净，先用煮沸的水浸泡0~10 min，再放入质量浓度为4~6%的氢氧化钠溶液中离析，离析时间为3~7天，待叶片的叶肉大量析出后，转入蒸馏水中清洗；

步骤三：去除叶片的被毛，再放入蒸馏水中清洗；

步骤四：将步骤三中蒸馏水清洗后的叶片小心转移至质量浓度为2~4%的次氯酸钠溶液中，浸渍时间为25~35 min，待叶片完全变白，转移至蒸馏水中清洗；

步骤五：将固定保存液A和蒸馏水制备成质量浓度为31~35%的固定保存液A和质量浓度为64~70%的固定保存液A，将步骤四处理后的叶片先放入质量浓度为31~35%的固定保存液A中处理10~30 min，再放入质量浓度为64~70%的固定保存液A中处理10~30min，最后放入固定保存液A中处理10~14h；

步骤六：将步骤五处理后的叶片放入质量浓度为0.5~1.5%的番红酒精染色剂中染色25~35 min；

步骤七：将步骤六中染色好的叶片放入无水乙醇和二甲苯混合液中5~10 min，然后将叶片转移至二甲苯中5~15 min，待叶片透明，叶脉完全展露出来，即可做切片；

步骤八：将切片自然晾干6~8天，放入切片盒中保存。

2.根据权利要求1所述的一种获得完整植物叶脉的方法，其特征在于：步骤二中的叶片可以是新鲜叶片，也可以是腊叶标本叶片。

3.根据权利要求1所述的一种获得完整植物叶脉的方法，其特征在于：步骤二中不同种类叶片的处理方法为：质地较厚硬的叶片，先用煮沸的水浸泡1~2 min，然后放入质量浓度为4~6%氢氧化钠溶液中离析；腊叶标本叶片，先用煮沸的水浸泡5~10 min，再放入质量浓度为4~6%氢氧化钠溶液中离析； 质地薄软的草本植物叶片，直接放入质量浓度为4~6% 氢氧化钠溶液中离析。

4.根据权利要求1所述的一种获得完整植物叶脉的方法，其特征在于：步骤三中叶片的被毛去除方法为：将用蒸馏水清洗后的叶片转移到无水乙醇中，叶片若不平整，先用玻璃片压平，8~12 min后在无水乙醇中用毛刷轻轻的朝一个方向刷。

5.根据权利要求1所述的一种获得完整植物叶脉的方法，其特征在于：步骤七中的混合溶液中，无水乙醇的体积份数为40~60%，二甲苯的体积份数为40~60%。