[发明专利]象耳豆根结线虫MSP19蛋白及其编码基因以及它们作为靶标在抑制线虫中的应用

说明书

本发明公开了象耳豆根结线虫MSP19蛋白及其编码基因以及它们作为靶标在抑制线虫中的应用。本发明提供了一种蛋白质，命名为MSP19蛋白，是序列表的序列5或序列1所示的蛋白质。编码MSP19蛋白的基因也属于本发明的保护范围，命名为MSP19基因。本发明还保护MSP19基因在培育对根结线虫的抗性降低的转基因植物中的应用。本发明还保护用于抑制MSP19基因表达的物质在培育对根结线虫的抗性增高的转基因植物中的应用。本发明为象耳豆根结线虫致病机理研究提供基因资源和防治的理论依据。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及象耳豆根结线虫MSP19蛋白及其编码基因以及它们作为靶标在抑制线虫中的应用。

背景技术

根结线虫(Meloidogyne spp.)是一类活体营养固着型内寄生植物病原线虫。根结线虫寄主范围广，适应性强，对农业生产危害严重，造成巨大经济损失。

象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii)于1983年在我国海南省首次发现，之前只在我国南方有分布，并未受到重视。但后续研究发现其寄主范围非常广泛，并且可以克服根结线虫抗性基因Mi-1基因和N基因，同时不会被根结线虫的生防菌穿刺巴氏杆菌(Pasteuria penetrans)寄生，表现出较强的致病力。由此可见，象耳豆根结线虫对我国农业生产威胁巨大，一旦发生大面积扩散或定殖，将会造成毁灭性的的灾害。

近年来随着产业结构调整，我国北方设施栽培面积逐步扩大，以及全球气候变暖等因素的影响使土壤温度的上升，将会使象耳豆根结线虫入侵内陆地区成为可能。据报道，象耳豆根结线虫已在我国广东、福建、广西、云南以及湖南等省份发现，一旦入侵内陆这将会给全国的农作物生产带来威胁。

由于对象耳豆根结线虫致病机理研究不足，传统的防治方法存在特异性差、副作用大、防效有限等突出问题。近年来随着分子生物学技术的发展，应用分子手段筛选与植物病原线虫寄生致病相关的基因，并深入研究其致病机理已成为植物病原线虫研究的热点。

发明内容

本发明的目的是提供象耳豆根结线虫MSP19蛋白及其编码基因以及它们作为靶标在抑制线虫中的应用。

本发明提供了一种蛋白质，获自象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii)，命名为MSP19蛋白，是如下(a1)或(a2)或(a3)或(a4)：

(a1)序列表的序列5所示的蛋白质；

(a2)序列表的序列1所示的蛋白质；

(a3)来源于象耳豆根结线虫且与(a1)或(a2)具有98％以上同一性且与象耳豆根结线虫的寄生和/或致病和/或发育相关的蛋白质；

(a4)将(a1)或(a2)所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且与象耳豆根结线虫的寄生和/或致病和/或发育相关的由(a1)或(a2)衍生的蛋白质。

编码MSP19蛋白的基因也属于本发明的保护范围，命名为MSP19基因。

MSP19基因为如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4)：

(b1)编码区如序列表的序列6所示的DNA分子；

(b2)编码区如序列表的序列2所示的DNA分子；

(b3)来源于象耳豆根结线虫且与(b1)或(b2)具有98％以上同一性且编码所述蛋白质的DNA分子；

(b4)在严格条件下与(b1)或(b2)杂交且编码所述蛋白质的DNA分子。

所述严格条件是在2×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次5min，又于0.5×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次15min。