[发明专利]时间分辨荧光免疫层析试剂条、制备方法及大麻浓度定量检测方法

说明书

本发明公开了一种时间分辨荧光免疫层析试剂条、制备方法及大麻浓度定量检测方法。试剂条包括样品垫、结合垫、包被膜、吸收垫及底板；所述样品垫、所述结合垫、所述包被膜依次顺序设置在所述底板上，所述吸收垫设置在所述包被膜上；所述结合垫上具有时间分辨荧光微球标记的大麻单克隆抗体，所述时间分辨荧光微球表面修饰有功能基团，所述时间分辨荧光微球填充有镧系元素；所述包被膜上设有检测线和质控线，所述检测线靠近于所述结合垫，所述质控线靠近于所述吸收垫，所述检测线包被有大麻‑BSA抗原，所述质控线包被有抗体。该试剂条灵敏度高、简便快速。

技术领域

本发明涉及生化检测技术领域，特别是涉及一种时间分辨荧光免疫层析试剂条、制备方法及大麻浓度定量检测方法。

背景技术

大麻是公认的三大毒品之一。通常用于吸食的植物大麻是指“印度大麻”，包括大麻植物的叶和花。大麻植物里已知的化学物质至少400多种，其中大麻酚类有60多种，具有类似的化学特性，大剂量使用可造成幻觉、妄想、精神失常。长期食用大麻可造成对其依赖，导致大脑高级认知功能损害，如注意力、记忆力、精细认知等功能损害。大麻还可引起躯体器质性损害，包括呼吸系统损害，引起支气管炎、肺气肿及组织病理学改变，成为癌症发生的高危因素。

目前，检测大麻的生物基质有血液、汗液、尿液、唾液、毛发以及指甲等。尿液是最常见的检测基质，尿液基质大麻检测窗口长达30天左右，具有易于使用、价格低廉等优势；唾液基质大麻检测窗口一般为24小时，主要用于路边毒驾检测，采样方便、快捷。毛发基质大麻检测窗口长达90天，同时还具有取样方便、易保存、易运输等优势，弥补了尿液、唾液基质检测窗口短的缺陷。尿液、唾液、毛发三种检测基质结合使用，能更全面客观评价被检测者的滥用情况。

目前针对大麻的检测方法主要有初筛和确认两种类型。确认方法主要有气相色谱、液相色谱以及气相色谱-质谱联用、液相色谱-质谱联用等方法，这些方法具有较高的灵敏度和特异性，但也存在操作复杂、耗时、设备昂贵且不易移动、需要专业人员操作等缺陷。目前国际公认的初筛方法是酶联免疫吸附法和胶体金免疫层析法，具有操作简便、价格便宜等优势，但酶联免疫吸附法操作专业性较强，需要专业人员进行操作，且相对较为费时、成本高；胶体金免疫层析法只能进行定性分析，灵敏度较低、批间差异较大。目前的免疫层析试剂条只针对尿液或唾液等一种基质，检测窗口短，只能追溯一个月内的毒品滥用情况，容易出现漏检。

发明内容

基于此，有必要提供一种灵敏度高、简便快速且能同时用于对尿液、唾液、毛发三种基质中大麻浓度定量检测的时间分辨荧光免疫层析试剂条、制备方法及大麻浓度定量检测方法。

一种时间分辨荧光免疫层析试剂条，其特征在于，包括样品垫、结合垫、包被膜、吸收垫及底板；

所述样品垫、所述结合垫、所述包被膜依次顺序设置在所述底板上，所述吸收垫设置在所述包被膜上并与所述包被膜接触；

所述结合垫上具有时间分辨荧光微球标记的大麻单克隆抗体，所述时间分辨荧光微球表面修饰有功能基团，所述时间分辨荧光微球填充有包含镧系元素的物质；

所述包被膜上设有检测线和质控线，所述检测线相比较于所述质控线更靠近于所述结合垫，所述检测线包被有大麻-BSA抗原，所述质控线包被有能够与大麻-BSA抗原结合的抗体。

在其中一个实施例中，所述功能基团包括羧基。

在其中一个实施例中，所述时间分辨荧光微球的粒径为100-500nm，激发波长为300-400nm，发射波长为600-700nm。

在其中一个实施例中，所述质控线与所述检测线之间的间距为3-8mm。

在其中一个实施例中，所述包被膜为硝酸纤维素膜。

一种时间分辨荧光免疫层析试剂条的制备方法，包括如下步骤：