[发明专利]一种薄壳山核桃果实活体接种的方法有效
| 申请号: | 202110157577.3 | 申请日: | 2021-02-04 |
| 公开(公告)号: | CN113040051B | 公开(公告)日: | 2022-03-15 |
| 发明(设计)人: | 吴天昊;巨云为 | 申请(专利权)人: | 南京林业大学 |
| 主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12Q1/18;A01H4/00 |
| 代理公司: | 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) 32274 | 代理人: | 邱兴天;邢少华 |
| 地址: | 210037 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 山核桃 果实 活体 接种 方法 | ||
1.一种薄壳山核桃果实活体接种的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)挑选薄壳山核桃树上的健康果实,消毒,再用灭过菌的针管刺伤果实待用;
2)将致病菌株接种到PDA培养基上进行活化,至菌丝布满整个培养基;用灭过菌的打孔器将PDA培养基中的菌丝切割成菌饼,有菌丝的一面贴紧果实的刺伤伤口处;使用菌饼覆盖装置盖住菌饼用力按压使其黏牢在果实上面;
3)调查接种点的发病情况;
所述菌饼覆盖装置包括覆盖管管体(1)、覆盖管管盖(2)和无菌脱脂棉(3),所述覆盖管管体(1)的底部封闭,并设有压实的无菌脱脂棉(3),所述无菌脱脂棉(3)处于水饱和状态,通过覆盖管管盖(2)控制覆盖管管体(1)的开闭状态;
所述覆盖管管体(1)的管口处沿边设有环形边沿(4),所述环形边沿(4)上设有黏胶条(5),黏胶条(5)上贴有保护膜;
所述覆盖管管体(1)设有向内突出的支撑凸起(6),所述支撑凸起(6)能够防止无菌脱脂棉(3)掉落。
2.根据权利要求1所述的薄壳山核桃果实活体接种的方法,其特征在于,步骤1)中,挑选9~10月份的薄壳山核桃树上的健康果实,用75%酒精消毒2 min,无菌蒸馏水冲洗3次,再用灭过菌的针管刺伤果实待用。
3.根据权利要求1所述的薄壳山核桃果实活体接种的方法,其特征在于,步骤2)中,将致病菌株接种到PDA培养基上进行活化,在25℃~28℃培养3-5d至菌丝布满整个培养基。
4.根据权利要求3所述的薄壳山核桃果实活体接种的方法,其特征在于,步骤2)中,致病菌株包括拟盘多毛孢、炭疽菌和拟茎点霉。
5.根据权利要求1所述的薄壳山核桃果实活体接种的方法,其特征在于,步骤2)中,用灭过菌的打孔器将PDA培养基中的菌丝切割成5mm × 5mm的菌饼。
6.根据权利要求1所述的薄壳山核桃果实活体接种的方法,其特征在于,所述覆盖管管体(1)呈上宽下窄的锥形面。
7.根据权利要求1所述的薄壳山核桃果实活体接种的方法,其特征在于,所述覆盖管管体(1)和覆盖管管盖(2)的材质为聚丙烯。
8.根据权利要求1所述的薄壳山核桃果实活体接种的方法,其特征在于,所述覆盖管管体(1)的长度为2cm,口径为1.5cm,管厚为2mm。
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