[发明专利]自动核酸提取检测仪及其检测方法在审
| 申请号: | 202110137358.9 | 申请日: | 2021-02-01 |
| 公开(公告)号: | CN112899141A | 公开(公告)日: | 2021-06-04 |
| 发明(设计)人: | 王庆伟;万逸 | 申请(专利权)人: | 海南微氪生物科技股份有限公司 |
| 主分类号: | C12M1/34 | 分类号: | C12M1/34;C12M1/38;C12M1/36;C12M1/02;C12M1/00;C12Q1/6806;C12Q1/6844 |
| 代理公司: | 海口翔翔专利事务有限公司 46001 | 代理人: | 莫臻 |
| 地址: | 570000 海南省海口市南海大道266*** | 国省代码: | 海南;46 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 自动 核酸 提取 检测 及其 方法 | ||
1.一种自动核酸提取检测仪,其特征在于,包括芯片及硬件系统,
所述芯片包括支撑体和分别设置在支撑体上的多个外壁具有弹性的容置腔,所述容置腔包括:
样品池,用于盛装样品,分别连通设置输入通道和转送管;
裂解池,内置含有磁珠的裂解溶液,为样品做核酸提取提供容纳空间,通过转送管与样品池相连通,所述裂解池还分别连通第一支管、第二支管、第三支管、第四支管和第五支管的一端;
洗涤溶液池,内置洗涤液,连通第二支管的另一端;
洗脱溶液池,内置洗脱液,连通第一支管的另一端;
LAMP缓冲液池,内置缓冲液,连通第四支管的另一端;
扩增检测池,内置含有荧光探针的冻干球,提供核酸检测的容纳空间,连通第五支管的另一端;
废液池,连通第三支管的另一端,
所述硬件系统包括用于插接芯片的侧挤压装置、用于调节各个容置腔的温度的温控模块、控制磁珠运动方向的磁力控制元件、进行核酸检测的荧光检测模块和调控自动核酸提取检测仪运行的微控制器,
所述侧挤压装置包括用于夹设芯片两个相对设置的侧壁,所述侧壁上相向对称设置多个分别挤压对应容置腔的可伸缩挤压柱,与裂解池对应的侧壁上还设置由磁力控制元件调节的可伸缩磁力柱。
2.根据权利要求1所述的自动核酸提取检测仪,其特征在于,所述温控模块包括加热元件板和冷却装置,所述加热元件板上设置温度传感器和多个加热元件,加热元件对应设置在所述裂解池及所述扩增检测池外侧,所述冷却装置、温度传感器和加热元件分别与微控制器相连。
3.根据权利要求1所述的自动核酸提取检测仪,其特征在于,所述磁力控制元件通过线圈控制可伸缩磁力柱的动作。
4.根据权利要求1所述的自动核酸提取检测仪,其特征在于,所述荧光检测模块包括分别设置在扩增检测池相对两侧的荧光光源和荧光检测器。
5.根据权利要求4所述的自动核酸提取检测仪,其特征在于,所述荧光光源通过相互连接的电源和数模转换器与微控制器连接;所述荧光检测器通过检测模块和模数转换器与微控制器相连。
6.根据权利要求1所述的自动核酸提取检测仪,其特征在于,所述容置腔的外壁开设使其与外部连通的微孔,所述微孔上填充用于密封容置腔的堵塞件。
7.根据权利要求1所述的自动核酸提取检测仪,其特征在于:还包括分别与微控制相连的网络接口或/和边缘连接器。
8.一种使用权利要求1-7所述的自动核酸提取检测仪的检测方法,其特征在于包括下面的步骤:
S1:插装芯片:样品通过输入通道加入芯片的样品池中,将芯片插入自动核酸提取检测仪的侧挤压装置中;
S2:裂解:微控制器调节相应的可伸缩挤压柱挤压样品池,样品通过转送管进入裂解池,温控模块加热裂解溶液到70℃~80℃进行裂解反应,
之后微控制器调整磁力控制元件,可伸缩磁力柱产生间歇磁场促使磁珠运动,磁珠吸附结合裂解后的核酸,
S3:洗涤:在磁力环境下可伸缩挤压柱挤压裂解池,使裂解反应后的反应溶液通过第三支管进入废液池,
与洗涤溶液池对应的可伸缩挤压柱挤压洗涤液至裂解池对结合核酸的磁珠进行清洗后,在磁力环境下将裂解池中的清洗液转入废液池;
S4:洗脱:可伸缩挤压柱侧挤压洗脱溶液池,洗脱液进入裂解池,分离结合在磁珠上的核酸;
S5:混合:挤压LAMP缓冲液池,使缓冲液进入裂解池后再次挤压裂解池,使其中的洗脱液、缓冲液和分离出来的核酸均进入扩增检测池;
S6:扩增:加热元件将扩增检测池中温度控制在60℃,使核酸在扩增检测池中进行核酸扩增;
S7:检测:微控制器控制荧光检测模块运行,完成扩增检测池中的核酸的检测。
9.根据权利要求8所述的检测方法,其特征在于步骤S3中,洗涤液为70%的乙醇。
10.根据权利要求8所述的检测方法,其特征在于步骤S3中,可伸缩磁力柱间歇提供磁力,促进磁珠在裂解池中变向运动。
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