[发明专利]一种鉴别道地药材十堰连翘基源的方法有效
| 申请号: | 202110133803.4 | 申请日: | 2021-02-01 |
| 公开(公告)号: | CN112946113B | 公开(公告)日: | 2022-09-30 |
| 发明(设计)人: | 高小康;张晓燕;李欧 | 申请(专利权)人: | 湖北医药学院 |
| 主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
| 代理公司: | 武汉蓝宝石专利代理事务所(特殊普通合伙) 42242 | 代理人: | 张文静 |
| 地址: | 442000 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 鉴别 道地 药材 十堰 连翘 方法 | ||
1.一种鉴别道地药材十堰连翘基源的方法,其特征在于,包括以下步骤:
植物形态鉴定,将待鉴定植物与木犀科Oleaceae连翘属Forsythia植物连翘Forsythiasuspensa(Thunb.)Vahl不同生长阶段的照片进行比对,确认待鉴定植物是否具有以下植物形态特征:
(1)嫩枝有单叶三裂至三出复叶;
(2)沿小枝节间纵向劈开,节间茎髓中空;
(3)花萼与花冠管近等长;
(4)果实长卵形有多数凸起的小斑点;
如待鉴定植物不符合上述植物形态特征任一项,则可判断为不是道地十堰连翘;
如待鉴定植物符合上述植物形态特征,再进行超高效液相色谱谱图特征核对,包括以下步骤:
制取待鉴定植物叶子的供试品溶液和十堰连翘叶子对照品溶液;
对所述供试品溶液和十堰连翘对照品溶液进行超高效液相色谱检测;
以十堰连翘对照品溶液的超高效液相色谱图作为指纹图谱,将供试品超高效液相色谱图与指纹图谱进行对比,若供试品图谱中出现了连翘酯苷B、连翘酯苷A、连翘苷和槲皮素的特征峰,则认为供试品符合超高效液相色谱特征;
同时符合植物形态特征和超高效液相色谱特征的即可鉴定为道地药材十堰连翘基源。
2.根据权利要求1所述的鉴别道地药材十堰连翘基源的方法,其特征在于,所述待鉴定植物叶子的供试品溶液的制备方法包括以下步骤:
将叶子粉碎成细粉,精密称定1g细粉加入到50ml具塞锥形瓶中,精密加入50%-70%甲醇15ml,称定重量,浸渍过夜,超声处理25min,放冷后再称定重量,用甲醇补足所失重量,摇匀,过滤;
精密量取续滤液5ml,置于坩埚中蒸至近干,加入0.5g中性Al2O3拌匀烘干,加在中性Al2O3柱上,100目~120目,1g,内径为1cm~1.5cm,用80ml的70%乙醇洗脱,收集洗脱液,浓缩至干,残渣用50%的甲醇溶解置于5ml容量瓶中,定容,摇匀,离心,取上层清。
3.根据权利要求1所述的鉴别道地药材十堰连翘基源的方法,其特征在于,供试品溶液和十堰连翘对照品溶液的超高效液相色谱条件为:采用VANGUARD预柱和Acquity UPLC BEHC18柱;柱温:35℃;检测波长235nm,流速:0.3mL/min-1mL/min;进样量1μl-2μl,采用流动相A及流动相B进行梯度洗脱,所述流动相A为0.2%的甲酸溶液,流动相B为乙腈,梯度洗脱条件为:0min~15min,90%~70%A;15min~25min,70%~30%A。
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