[发明专利]一种具有较优β-甘露聚糖酶和α-半乳糖苷酶酶活比的酶液及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种酶液的应用，其特征在于，以里氏木霉为产酶菌株，以微晶纤维素和蜜二糖为碳源进行发酵培养，发酵培养结束后，培养液经处理得到具有可以提高半乳甘露聚糖定向酶水解制备小分子半乳甘露聚糖和半乳甘露低聚糖得率的β-甘露聚糖酶和α-半乳糖苷酶酶活比的酶液；其中，微晶纤维素的浓度为15 g/L，蜜二糖的浓度为10 g/L；

采用所述酶液，以半乳甘露聚糖为底物，制备小分子半乳甘露聚糖和半乳甘露低聚糖；具体为： 向反应容器中加入半乳甘露聚糖、加入蒸馏水、酶液和浓度为1 mol/L柠檬酸缓冲液，充分混合均匀，在50 ℃条件下反应24 h；反应结束后将酶水解物置于100 ℃下处理10min使酶失活，然后在10000 转/分条件下离心10 min，上清液即为含小分子半乳甘露聚糖和半乳甘露低聚糖的酶解液；其中酶解反应时底物浓度2%、酶加量20 U/g半乳甘露聚糖、pH值4.8。

2.根据权利要求1所述酶液的应用，其特征在于，酶液的制备包括以下步骤： （1）产酶培养基：由以下组分组成：葡萄糖1.0 g/L，微晶纤维素15 g/L，蜜二糖10 g/L，硫酸铵4.72g/L，尿素2.15 g/L，磷酸二氢钾2.0 g/L，无水氯化钙0.3 g/L，七水合硫酸镁0.3 g/L，七水合硫酸亚铁0.005 g/L，七水合硫酸锰0.0016 g/L，七水合硫酸锌0.0014 g/L，氯化钴0.002g/L；向其中加入浓度为1 mol/L的柠檬酸钠缓冲液50 mL，调节培养基的pH至4.8； （2）发酵：将产酶培养基50 mL置于250 mL带棉塞的三角瓶中，按10%的接种量接入里氏木霉孢子，置于28-30 ℃、170转/分的恒温摇床中培养4天，培养结束后培养液于3000转/分下离心10min，得到上清液，即为所述酶液。