[发明专利]一种禽白血病病毒A/B/J亚群三重PCR检测引物及其应用

权利要求书

1.一种禽白血病病毒A/B/J亚群三重PCR检测引物，其特征在于，所述检测引物包括分别用于检测禽白血病病毒A、B和J亚群的引物，其中，禽白血病病毒亚群A检测引物为：

上游引物F1：AGCCGGGGAACCTTTGGATTACAT

下游引物R1：TCCGCAACACCCACTGACATTACC

禽白血病病毒亚群B检测引物为：

上游引物F2：TCCTGGCGGCCCTGAGAACA

下游引物R2：CCGCAACATCCGCTGACATTACC

禽白血病病毒亚群J检测引物为：

上游引物F3：ATAAGACGGGCCGAACAGATTTTT

下游引物R3：CGCCCCACCAGTCCCATTA；

以上引物如SEQ ID NO.1、2、3、4、5、6所示。

2.权利要求1所述的禽白血病病毒A/B/J亚群三重PCR检测引物在禽白血病病毒检测中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

(1)病毒分离及基因组提取；

(2)多重PCR反应；

(3)结果判断。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，PCR进行扩增反应的反应条件为：95℃预变性5min；95℃变性1min，58℃退火45s，72℃延伸2min，共35次循环；72℃再延伸10min。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，禽白血病病毒亚群A检测引物浓度为0.6μmol/L，禽白血病病毒亚群B检测引物浓度为0.3μmol/L，禽白血病病毒亚群J检测引物浓度为0.5μmol/L。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，结果判断方式为：如果扩增出761bp片段，则判断有禽白血病病毒亚群A；如果扩增出579bp片段，则判断有禽白血病病毒亚群B；如果扩增出353bp片段，则判断有禽白血病病毒亚群J。