[发明专利]一种心型脂肪酸结合蛋白快速检测卡

说明书

本发明公开了心型脂肪酸结合蛋白快速定量试纸条。该试纸条包括PVC底板、吸水垫、硝酸纤维素膜、标记物垫、样品垫和稀释液垫；纤维素膜固定在底板上，在硝酸纤维素膜一端放置吸水垫，另一端放置稀释液垫；标记物垫放置在纤维素膜上且位于稀释液垫前方，并在标记物垫和稀释液垫之间保留纤维素膜的裸露空间；在标记物垫上设置样品垫；在纤维素膜上吸水垫与标记物垫之间的区间沿着从标记物垫到吸水垫方向依次设置检测线和质控线；在检测窗检测线和标记物垫之间设置定量标识线。本发明通过控制样品液和标记物反应的复合物双向侧流至到定量标识线，实施精确控制免疫反应量；并该延迟加入稀释液的设计，大大增加免疫反应时间，提高了检测灵敏度和精密度。

技术领域

本发明属于生物检测领域，具体涉及一种免疫层析双孔加样心型脂肪酸结合蛋白快速定量检测卡。

背景技术

胶体金免疫层析技术(GICA)是70年代发展起来的一项快速免疫检测方法，它以硝酸纤维素膜为载体，利用硝酸纤维素膜对蛋白吸附和毛细管吸虹特性，不但把免疫反应的蛋白牢固地固定在硝酸纤维素膜上；又能使滴加的液体样本在吸水垫的作用下，从膜的一侧慢慢向另一侧流动。当被测液体样本中含有特异抗体或抗原，它们可以和标记胶体金的抗体(或抗原)发生免疫反应形成复合物，再与固定在硝酸纤维素膜上对应抗原(或抗体)结合，形成显示胶体金颜色的免疫结合物。该技术简单、快速、不需要任何仪器设备，5-20分钟内就能显示检测结果。现已广泛应用于免疫学检测各个方面。

针对胶体金免疫层析技术，存在灵敏度低，检测线性范围窄，重金属污染，检测结果主观性等较多情况，科研工作者又开发出了带颜色的乳胶、荧光微球、磁微球、荧光色素等示踪标记物，提高检测的灵敏性和检测线性范围，又减少重金属污染。同时科研工作者还开发了相应仪器检测快诊试纸条的方法，从而使层析免疫检测结果显示更客观，使层析免疫技术推广到更大的应用空间。

现有技术的检测卡，其采用的设计方式是在硝酸纤维素膜一端放置吸水垫，另一端放置标记物垫，在标记物垫上依次放置滤物垫(如滤血垫)、样品垫和加样孔。硝酸纤维素膜与吸水垫搭接的重叠宽度为1-2mm，与标记物垫搭接的重叠宽度为1-2mm。当样本液、样本稀释液加入加样孔后，样本、标记物和稀释液均仅向吸水垫方向侧流层析。通过加样量和免疫反应时间两维控制的方式，确保检测结果的准确性和精密性。在应用过程中和大量试验，发现一个问题，由于被测样本与标记垫中的标记物反应时间短，样本液与标记垫中的标记的抗原或抗体反应在吸水垫的引力作用下，免疫反应形成梯度分布，并存在一个“未能反应的死角”，尤其当样本基质之间的粘稠差异较大时，使标记垫中的标记物由于参加免疫反应的液量不一致，“死角”问题更突显，导致渗透释放到硝酸纤维素膜的被测的样本和标记的抗原或抗体的总量产生偏差，直接影响检测结果的准确性和稳定性。因此，如何解决上述问题成为本领域人员研究的重点。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明提供了一种心型脂肪酸结合蛋白快速检测试纸条。

本发明所提供的心型脂肪酸结合蛋白快速检测试纸条，包括PVC底板、吸水垫、硝酸纤维素膜、标记物垫、样品垫和稀释液垫；所述硝酸纤维素膜固定在PVC底板上，所述硝酸纤维素膜一端搭接吸水垫，另一端搭接稀释液垫；所述标记物垫放置在所述硝酸纤维素膜上且位于所述稀释液垫前方，所述吸水垫的方向定义为前方；所述标记物垫上设置所述样品垫；在所述硝酸纤维素膜上从标记物垫到吸水垫依次设置检测线(T线)和质控线(C线)；在所述标记物垫和检测线(T线)之间设置定量标识线(M线)；所述标记物垫上包被有标记物标记的鸡IgY、标记物标记的心型脂肪酸结合蛋白抗体；所述质控线处包被羊抗鸡IgY的IgG，所述检测线处包被心型脂肪酸结合蛋白抗体。

作为优选，所述样品垫上面可设置相应的滤物垫，如滤血垫等。

作为优选，所述标记物垫上的标记物为胶体金、荧光素、镧系荧光、彩色乳胶、量子点、上转换荧光物质、磁荧光微球、以及酶标记、化学发光等示踪物质，也包括无需标记示踪物的试纸侧流反应体系。