[发明专利]一种黑曲霉、胞外分泌产物及应用在审

申请号：	202110095046.6	申请日：	2021-01-25
公开（公告）号：	CN113416648A	公开（公告）日：	2021-09-21
发明（设计）人：	刘雪;马晟;徐其静;罗增明;李林;方迪	申请（专利权）人：	西南林业大学
主分类号：	C12N1/14	分类号：	C12N1/14;C12P1/02;C02F3/34;C12R1/685;C02F101/20
代理公司：	重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙) 50230	代理人：	陈炳萍
地址：	650224 ***	国省代码：	云南;53
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摘要：
搜索关键词：	一种曲霉外分泌产物应用
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【权利要求书】：

1.如权利要求3所述黑曲霉胞外分泌产物制备方法，其特征在于，所述平板培养基包括：按照200g/L的比例称取马铃薯200g，将称取的马铃薯去皮洗净，切成小块，加水煮至马铃薯变软，用八层纱布过滤，滤液加入15～20g/L的琼脂和20g/L葡萄糖，混匀后用蒸馏水补充至1000mL，121℃灭菌20min，即可得平板培养基。

2.如权利要求3所述黑曲霉分泌产物制备方法，其特征在于，步骤二中，所述发酵培养基包括：将1.5g/L NaNO₃、0.5g/L KH₂PO₄、0.025g/L KCl、0.025g/L MgSO₄·7H₂O、120g/L乳糖以及2.6g/L酵母膏混合，调节pH为6.5，121℃高压灭菌20min即可得所述发酵培养基。

3.如权利要求3所述黑曲霉胞外分泌产物制备方法，其特征在于，步骤二中，所述培养至预定时间包括：培养预定时间为116h。

4.如权利要求3所述黑曲霉胞外分泌产物制备方法，其特征在于，步骤四中，所述氯仿:正丁醇＝5:1(V/V)；

步骤四中，所述离心包括：离心速度为8000rpm，离心时间为10min，离心温度为4℃；

步骤五中，所述将脱蛋白处理后的ECP溶液采用乙醇分级沉淀冷冻离心包括：将脱蛋白处理后的ECP溶液用25％冰乙醇于4℃下沉淀24h，去除核酸；离心收集上清液；再用75％冰乙醇于4℃下沉淀24h。

5.一种重金属废水污染治理与修复方法，其特征在于，所述如权利要求2所述的黑曲霉胞外分泌产物。

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