[发明专利]神经干细胞分化为少突胶质细胞的方法、培养基及用途

权利要求书

1.一种神经干细胞分化为少突胶质细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：

将待分化神经干细胞在第一诱导基中培养，形成少突胶质前体细胞；将少突胶质前体细胞在第二诱导基中培养，形成少突胶质细胞；

其中，所述第一诱导基中包含第一混合诱导液、血小板衍生生长因子PDGF-aa和表皮生长因子EGF，所述第一混合诱导液中含有KnockOut血清替代物；所述第二诱导基中包含第二混合诱导液和音猬因子Shh，所述第二混合诱导液中含有KnockOut血清替代物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一混合诱导液中KnockOut血清替代物的浓度为2～25vol％；以第一混合诱导液为基准，血小板衍生生长因子PDGF-aa浓度为2～25ng/mL，表皮生长因子EGF浓度为5～40ng/mL；

所述第二混合诱导液中KnockOut血清替代物的浓度为2～25vol％；以第二混合诱导液为基准，音猬因子Shh浓度为5～40ng/mL。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述第一混合诱导液中还含有70～96vol％的DMEM:F12(1:1)液体培养基、0.5～5vol％的B27细胞培养添加剂和0.2～3vol％青霉素-链霉素混合液；

所述第二混合诱导液中还含有70～96vol％DMEM:F12(1:1)液体培养基、0.5～5vol％的B27细胞培养添加剂和0.2～3vol％青霉素-链霉素混合液。

4.根据权利要求1～3任一项所述的方法，其特征在于，所述待分化神经干细胞由提取的神经干细胞采用表皮生长因子EGF和成纤维细胞生长因子bFGF双因子筛选法筛选，在明胶包被的培养容器中培养2～7代得到。

5.一种诱导神经干细胞分化为少突胶质前体细胞的培养基，其特征在于，所述培养基中包含KnockOut血清替代物、血小板衍生生长因子PDGF-aa和表皮生长因子EGF。

6.一种诱导少突胶质前体细胞分化为少突胶质细胞的培养基，其特征在于，所述培养基中包含KnockOut血清替代物和音猬因子Shh。

7.一种KnockOut血清替代物在诱导神经干细胞分化为少突胶质前体细胞中的用途。

8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，将待分化神经干细胞在含有KnockOut血清替代物、血小板衍生生长因子PDGF-aa和表皮生长因子EGF的培养基中培养。

9.一种KnockOut血清替代物在诱导少突胶质前体细胞为少突胶质细胞中的用途。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，所述少突胶质前体细胞在含有KnockOut血清替代物和音猬因子Shh的培养基中培养。