[发明专利]氨基葡萄糖-6磷酸合成酶突变体及其应用

权利要求书

1.一种氨基葡萄糖-6磷酸合成酶（glmS）突变体，其特征在于，是将氨基酸序列如SEQID NO.2所示的野生glmS的第39位和149位的丙氨酸突变为苏氨酸，第211位的天冬氨酸突变为天冬酰胺，第250位的精氨酸突变为半胱氨酸以及第472位的甘氨酸突变为丝氨酸。

2.一种编码权利要求1所述的氨基葡萄糖-6磷酸合成酶突变体的基因。

3.根据权利要求2所述的基因，其特征在于，所述的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

4.一种携带权利要求2所述的基因的表达载体。

5.一种表达权利要求1所述的氨基葡萄糖-6磷酸合成酶突变体的细胞。

6.一种生产乙酰氨基葡萄糖的方法，其特征在于，所述的方法是以权利要求1所述的氨基葡萄糖-6磷酸合成酶突变体为催化剂，催化葡萄糖生产乙酰氨基葡萄糖。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的方法具体是以大肠杆菌为宿主，重组表达编码所述的氨基葡萄糖-6磷酸合成酶突变体的基因，得到重组菌；将重组大肠杆菌经种子培养基活化后转入发酵培养基，于35~38℃、pH=6~8条件下培养，OD₆₀₀达到18~22时加入IPTG诱导氨基葡萄糖-6磷酸合成酶突变体的表达，使重组菌以葡萄糖为底物生产乙酰氨基葡萄糖。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，种子培养基按g/L计含有：胰蛋白胨5~15，酵母粉3~7，NaCl 8~12。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，发酵培养基按g/L计含有：胰蛋白胨10~15，酵母粉20~30，磷酸氢二钾12~13，磷酸二氢钾2~3，甘油2~6，葡萄糖流加。

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述的IPTG的浓度为0.2~0.6 mM。