[发明专利]一种同时检测版纳病毒、卡地皮诺病毒和蚊传黄病毒的核酸组合物、试剂盒及方法

权利要求书

1.一种同时检测版纳病毒、卡地皮诺病毒和蚊传黄病毒的核酸组合物，其特征在于，包括以下引物和探针序列：

版纳病毒正向引物序列SEQ ID No.1；

版纳病毒反向引物序列SEQ ID No.2；

版纳病毒探针序列SEQ ID No.3；

卡地皮诺病毒正向引物序列SEQ ID No.4；

卡地皮诺病毒反向引物序列SEQ ID No.5；

卡地皮诺病毒探针序列SEQ ID No.6；

蚊传黄病毒正向引物序列SEQ ID No.7；

蚊传黄病毒反向引物序列SEQ ID No.8；

蚊传黄病毒探针序列SEQ ID No.9。

2.根据权利要求1所述的一种同时检测版纳病毒、卡地皮诺病毒和蚊传黄病毒的核酸组合物，其特征在于：所述版纳病毒、卡地皮诺病毒和蚊传黄病毒的探针序列的5’端均采用荧光报告基团修饰，3’端均采用荧光淬灭基团修饰。

3.一种同时检测版纳病毒、卡地皮诺病毒和蚊传黄病毒的试剂盒，其特征在于：包括权利要求1或2所述的一种同时检测版纳病毒、卡地皮诺病毒和蚊传黄病毒的核酸组合物。

4.根据权利要求3所述的一种同时检测版纳病毒、卡地皮诺病毒和蚊传黄病毒的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括PCR反应试剂和酶混合液。

5.根据权利要求4所述的一种同时检测版纳病毒、卡地皮诺病毒和蚊传黄病毒的试剂盒，其特征在于：所述PCR反应试剂包括RT-PCR buffer、dNTP、tris-base、MnCl₂和甘油。

6.根据权利要求4所述的一种同时检测版纳病毒、卡地皮诺病毒和蚊传黄病毒的试剂盒，其特征在于：所述酶混合液包括逆转录酶、热启动Taq DNA聚合酶、RNA酶抑制剂和酶稀释液。

7.根据权利要求6所述的一种同时检测版纳病毒、卡地皮诺病毒和蚊传黄病毒的试剂盒，其特征在于：所述逆转录酶、热启动Taq DNA聚合酶、RNA酶抑制剂和酶稀释液的体积比为1:2:2:3。

8.一种同时检测版纳病毒、卡地皮诺病毒和蚊传黄病毒的方法，其特征在于：采用权利要求3-7任意一项所述的一种同时检测版纳病毒、卡地皮诺病毒和蚊传黄病毒的试剂盒，并采用荧光定量PCR法，包括以下步骤：

S1.提取样本的核酸；

S2.采用试剂盒对样本的核酸进行扩增反应；

S3.根据荧光信号强度判断检测样本的阴阳性。