[发明专利]基于PCR扩增仓的搅动控制方法有效
| 申请号: | 202110057693.8 | 申请日: | 2021-01-15 |
| 公开(公告)号: | CN113174327B | 公开(公告)日: | 2021-12-31 |
| 发明(设计)人: | 任鲁风;蔡亦梅;高静;范东雨;李洁昆;张瑜;贾欣月;金鑫浩 | 申请(专利权)人: | 北京中科生仪科技有限公司 |
| 主分类号: | C12M1/38 | 分类号: | C12M1/38;C12M1/34;C12M1/00;C12Q1/6806;C12Q1/686 |
| 代理公司: | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人: | 姜艳华 |
| 地址: | 100176 北京市大兴区北京经*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 基于 pcr 扩增 搅动 控制 方法 | ||
1.一种基于PCR扩增仓的搅动控制方法,其特征在于,包括:
当待扩增反应物进入扩增仓内时,记录记忆金属在第一温度和第二温度下的第一长度和第二长度;
建立第一扰动函数T1(t1i,L1i,Q1i)和第二扰动函数T2(t2i,L2i,Q2i),其中t1i,t2i分别表示第i周期内的第一温度和第二温度,L1i,L2i分别表示第i周期内的对应的记忆金属的长度;Q1i,Q2i分别表示第i周期内的所述待扩增反应物与冻干球的混合度;
比较所述第一扰动函数和所述第二扰动函数,得到第一比较函数T12(t1i-t2i,L1i-L2i,Q1i-Q2i);设定第一比较标准函数T120,若所述第一比较函数的各个参量均在所述第一比较标准函数T120范围内,则继续后续扩增反应,否则调整对应温度下的长度参量;
在多个反应周期内,根据所述记忆金属的第一长度和第二长度调整所述当前的反应温度,以使所述待扩增反应物在预设的温度下进行,获取符合要求的所述待扩增反应物与所述冻干球的混合度;
分别比较相邻周期内的第一扰动函数T1(t1i+1,L1i+1,Q1i+1)-T1(t1i,L1i,Q1i),得到第一扰动函数差值;比较相邻周期内的第二扰动函数T2(t2i+1,L2i+1,Q2i+1)-T2(t2i,L2i,Q2i),得到第二扰动函数差值;建立第一扰动标准差值和第二扰动标准差值,若所述第一扰动函数差值与所述第一扰动标准差值符合,若所述第二扰动函数差值与所述第二扰动标准差值符合,则继续周期扩增反应,否则调整所述对应温度下的记忆金属的长度参量;
当前时间节点内的所述扩增仓内的所述待扩增反应物与所述冻干球的混合度与第一个周期内的所述待扩增反应物与所述冻干球的混合度进行比较;若所述待扩增反应物与所述冻干球的混合度没有增加,则混合充分。
2.根据权利要求1所述的基于PCR扩增仓的搅动控制方法,其特征在于,比较当前时间节点内的最后一个周期内的所述待扩增反应物与所述冻干球的混合度与倒数第二个周期内的所述待扩增反应物与所述冻干球的混合度进行比较;若所述待扩增反应物与所述冻干球的混合度没有增加,则结束搅动混合充分,若混合度增加,则继续搅动。
3.根据权利要求1所述的基于PCR扩增仓的搅动控制方法,其特征在于,建立混合度矩阵(Q1i,Q2i),其中,Q1i,Q2i分别表示第i周期内的第一混合度和第二混合度;
比较相邻周期内的混合度矩阵,得到混合度差值,若所述混合度差值为0,则混合充分。
4.根据权利要求1所述的基于PCR扩增仓的搅动控制方法,其特征在于,所述记忆金属的原始长度为半环形的环形长度;
所述扩增仓设置在管路层内,所述管路层上设置有加样层,所述加样层下侧设置有垫片,所述管路层的下侧还设置有密封膜,用以实现密封;
其中,
所述加样层上侧设置有加样孔,用以向芯片内添加样品,注入芯片内的样品依次经过核酸提取、纯化、扩增反应;
所述加样层与管路层通过卡条与设置在管路层侧部的限位架活动连接,相应的,在限位架的内侧设置有第一卡槽,第一卡槽通过卡条相互配合连接,以实现加样层和管路层的相对位置切换和固定;
第二卡槽,所述第二卡槽设置在所述限位架的内侧,位于所述第一卡槽的下方;
在运输或存储时,所述加样层与所述第一卡槽连接;
在使用时,将所述垫片抽出,向下按压所述加样层,使得所述加样层与所述第二卡槽连接,同时,刺针设置在管路层上的立柱上,用以刺破设置在所述加样层内的试剂,以使试剂和样品进行混合反应;
当所述加样层与所述管路层压合后,设置在所述加样层底部的第一应变片检测所述加样层和所述管路层之间的挤压力,用以确定所述加样层和所述管路层在压合过程中受力的均匀性。
5.根据权利要求3所述的基于PCR扩增仓的搅动控制方法,其特征在于,所述第一温度为起始温度,所述第二温度为形变温度。
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