[发明专利]一种鸡成纤维细胞转分化为原始生殖细胞介导生产转基因鸡的方法

权利要求书

1.一种鸡成纤维细胞转分化为原始生殖细胞介导生产转基因鸡的方法，其特征是，通过OCT4,SOX2,NANOG,LIN28A诱导鸡CEF重编程为iPS；通过BMP4/BMP8b/EGF诱导鸡iPS分化为iPGC；鸡iPGC血管注射介导转基因鸡生产。

2.根据权利要求1所述的一种鸡成纤维细胞转分化为原始生殖细胞介导生产转基因鸡的方法，其特征是是,具体做法为：

前期通过OCT4,SOX2,NANOG,LIN28A慢病毒过表达载体将鸡成纤维细胞诱导重编程为iPS；

然后通过BMP4/BMP8b/EGF体系将鸡iPS细胞诱导分化为PGC-like细胞；

然后其注射至孵化2.5天的受体鸡胚血管，封口后继续孵化至出壳，记为F0代，F0代嵌合体鸡饲养至性成熟，公母鸡进行交配产生F1代，观察并记录F1代出壳时羽色及胫色等表型性状，统计阳性后代鸡比例，并对其进行翅静脉采血，提取血液基因组进行基因组测序或微卫星位点检测，结果发现能够F1代鸡中存在阳性转基因鸡。