[发明专利]用于同时调节基因表达的组合物和方法

权利要求书

1.包含重组多核酸构建体的组合物，其包含：

(i)至少一个编码或包含能够结合靶RNA的小干扰RNA(siRNA)的核酸序列；和

(ii)至少一个编码目的基因的核酸序列；

其中靶RNA不同于由目的基因编码的mRNA，且

其中以顺序方式包含所述至少一个编码目的基因的核酸序列和所述至少一个编码或包含siRNA的核酸序列。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述至少一个编码或包含能够结合靶RNA的siRNA的核酸序列和所述至少一个编码目的基因的核酸序列是分隔开的。

3.根据权利要求1所述的组合物，其中所述至少一个编码或包含能够结合靶RNA的siRNA的核酸序列位于所述至少一个编码目的基因的核酸序列的下游。

4.根据权利要求1所述的组合物，其中所述至少一个编码或包含能够结合所述靶RNA的siRNA的核酸序列位于所述至少一个编码目的基因的核酸序列的上游。

5.根据权利要求1所述的组合物，其中所述siRNA不抑制所述目的基因的表达。

6.根据权利要求1所述的组合物，其中通过表达所述目的基因编码的mRNA或蛋白质，所述目的基因的表达被调节，并且任选地被上调。

7.根据权利要求3所述的组合物，其中，与所述目的基因自如下重组多核酸构建体的表达相比，所述目的基因的表达增加，其中所述重组多核酸构建体包含：至少一个编码或包含能够结合靶RNA的siRNA的核酸序列；和至少一个编码目的基因的核酸序列，其中所述编码或包含能够结合靶RNA的siRNA的核酸序列位于编码目的基因的核酸序列的上游。

8.根据权利要求1所述的组合物，其中，通过能够结合所述靶RNA的所述siRNA，所述靶RNA的表达被调节，并且任选地被下调。

9.根据权利要求3所述的组合物，其中与所述靶RNA自如下重组多核酸构建体的下调相比，所述靶RNA的下调增强，其中所述重组多核酸构建体包含：至少一个编码或包含能够结合靶RNA的siRNA的核酸序列；和至少一个编码目的基因的核酸序列；其中所述编码或包含能够结合所述靶RNA的siRNA的核酸序列位于所述编码目的基因的核酸序列的上游。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的组合物，其中所述重组多核酸构建体包含两个或更多个编码或包含能够结合靶RNA的siRNA的核酸序列，其中所述两个或更多个核酸序列各自编码或包含能够结合相同靶RNA或不同靶RNA的siRNA。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的组合物，其中所述重组多核酸构建体包含两个或更多个编码目的基因的核酸序列，其中所述两个或更多个核酸序列各自编码相同的目的基因或不同的目的基因。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的组合物，其中所述重组多核酸构建体还包含编码或包含接头的核酸序列。

13.根据权利要求12所述的组合物，其中，通过所述编码或包含所述接头的核酸序列连接(a)所述至少一个编码或包含能够结合靶RNA的siRNA的核酸序列和所述至少一个编码目的基因的核酸序列，(b)所述两个或更多个编码或包含能够结合靶RNA的siRNA的核酸序列中的每一个，和/或(c)所述两个或更多个编码目的基因的核酸序列中的每一个。

14.根据权利要求12或13所述的组合物，其中所述接头包括tRNA接头、2A肽接头或柔性接头。

15.根据权利要求12-14中任一项所述的组合物，其中所述编码或包含所述接头的核酸序列的长度为约6至约80个核酸残基。