[发明专利]B淋巴细胞特异性鹅膏毒素抗体缀合物

权利要求书

1.缀合物，其包含(i)靶点结合部分，(ii)至少一种毒素，和(iii)任选存在的至少一种连接所述靶点结合部分和所述至少一种毒素的连接基，其中所述靶点结合部分结合CD20，并且其中所述至少一种毒素为鹅膏毒素。

2.权利要求1的缀合物，其中所述靶点结合部分选自：

(i)抗体，优选单克隆抗体；

(ii)其抗原结合片段，优选可变结构域(Fv)、Fab片段或F(ab)₂片段；

(iii)其抗原结合衍生物，优选单链Fv(scFv)；和

(iv)抗体样蛋白，

每个分别与CD20结合。

3.权利要求2的缀合物，其中所述抗体或其抗原结合片段或其抗原结合衍生物分别为鼠抗体、嵌合抗体、人源化抗体或人抗体，或其抗原结合片段或其抗原结合衍生物。

4.权利要求2的缀合物，其中所述抗体或其抗原结合片段或其抗原结合衍生物分别选自利妥昔单抗、阿托珠单抗、替伊莫单抗、托西莫单抗、奥法木单抗、奥瑞珠单抗和乌妥昔单抗。

5.权利要求2-4中任一项的缀合物，其中所述抗体已经基因工程化以包含根据EU编号系统的重链118Cys、重链239Cys或重链265Cys，优选地，根据EU编号系统的重链265Cys，并且其中所述连接基，如果存在，或所述鹅膏毒素分别通过所述重链118Cys或所述重链239Cys或重链265Cys残基连接至所述抗体。

6.权利要求2-4中任一项的缀合物，其中所述连接基，如果存在，或所述鹅膏毒素通过所述抗体的任何天然的Cys残基，优选通过二硫键与所述抗体连接。

7.权利要求4-6中任一项的缀合物，其中所述抗体为利妥昔单抗，或者已经基因工程化以包含根据EU编号系统的重链265Cys的利妥昔单抗。

8.权利要求4-6中任一项的缀合物，其中所述抗体为利妥昔单抗，并且其中所述连接基，如果存在，或所述鹅膏毒素通过任何天然存在的Cys残基与利妥昔单抗连接，所述Cys残基形成利妥昔单抗的链间二硫键。

9.权利要求1-8中任一项的缀合物，其中所述连接基是不可裂解连接基或可裂解连接基。

10.权利要求9的缀合物，其中所述可裂解连接基选自酶可裂解连接基，优选蛋白酶可裂解连接基；和化学可裂解连接基，优选包含二硫键的连接基。

11.权利要求1-10中任一项的缀合物，其中所述鹅膏毒素包含(i)具有6’-脱氧位置的氨基酸4和(ii)具有S-脱氧位置的氨基酸8。

12.权利要求1-11中任一项的缀合物，其中所述连接基，如果存在，或所述靶点结合部分通过(i)鹅膏毒素氨基酸1的γC原子，或(ii)鹅膏毒素氨基酸3的δC原子，或(iii)鹅膏毒素氨基酸4的6’-C原子连接至所述鹅膏毒素。

13.权利要求1-11中任一项的缀合物，其中所述缀合物包含分别为任意下列式(I)至式(XII)的化合物作为连接基-鹅膏毒素部分：

14.权利要求2-5中任一项的缀合物，其中所述缀合物包含缀合至鹅膏毒素连接基部分的作为靶点结合部分的抗体，其为式XIII至XXII中的任一种：

其中，所述鹅膏毒素连接基部分与所述抗体的天然存在的赖氨酸残基的ε-氨基偶联，并且其中n优选为1-7。