[发明专利]异串联双环肽复合物

说明书

本发明涉及异串联双环肽复合物，其包含结合EphA2的第一肽配体，所述第一肽配体通过接头与两个结合CD137的第二肽配体缀合。本发明还涉及所述异串联双环肽复合物在预防、抑制或治疗癌症中的用途。

技术领域

本发明涉及异串联(heterotandem)双环肽复合物，其包含结合EphA2的第一肽配体，所述第一肽配体通过接头与两个结合CD137的第二肽配体缀合。本发明还涉及所述异串联双环肽复合物在预防、抑制或治疗癌症中的用途。

背景技术

环肽可以以高亲和力和靶标特异性与蛋白质靶标结合，因此是对于治疗剂开发有吸引力的分子类别。事实上，临床上已经成功使用了几种环肽，例如抗菌肽万古霉素、免疫抑制剂环孢霉素或抗癌药奥曲肽(Driggers等人(2008),Nat Rev Drug Discov 7(7),608-24)。良好的结合特性是由于肽与靶标之间形成的相对较大的相互作用表面以及环状结构的构象柔韧性降低所致。通常，大环与数百平方埃的表面结合，例如环肽CXCR4拮抗剂CVX15(Wu等人(2007),Science 330,1066-71)、具有与整联蛋白αVb3结合的Arg-Gly-Asp基序的环肽(Xiong等人(2002),Science 296(5565),151-5)或结合尿激酶型纤溶酶原激活因子的环肽抑制剂upain-1(Zhao等人(2007),J Struct Biol 160(1),1-10)。

由于其环状构型，肽大环比线性肽柔韧性差，导致与靶标结合后熵损失较小，并导致更高的结合亲和力。与线性肽相比，降低的柔韧性还导致锁定靶标特异性构象，增加结合特异性。这种作用已通过一种基质金属蛋白酶8(MMP-8)的有效的和选择性抑制剂得到了例证，该抑制剂在开环时失去相对于其他MMP的选择性(Cherney等人(1998),J Med Chem 41(11),1749-51)。通过大环化获得的有利的结合性质在具有多于一个肽环的多环肽中更为显著，例如在万古霉素、乳酸链球菌肽和放线菌素中。

不同的研究团队先前已将具有半胱氨酸残基的多肽系于(tether)一个合成的分子结构上(Kemp和McNamara(1985),J.Org.Chem；Timmerman等人(2005),ChemBioChem)。Meloen和同事已使用三(溴甲基)苯和相关分子将多个肽环快速定量地环化到合成支架上，以结构模拟蛋白质表面(Timmerman等人(2005),ChemBioChem)。WO 2019/122860和WO2019/122863中公开了生成候选药物化合物的方法，其中所述化合物是通过将含有半胱氨酸的多肽连接到分子支架上而生成的，所述分子支架例如1,1',1”-(1,3,5-三嗪烷-1,3,5-三基)三丙-2-烯-1-酮(TATA)。

已经开发了基于噬菌体展示的组合方法以生成和筛选针对目标靶标的双环肽的大型文库(Heinis等人(2009),Nat Chem Biol 5(7),502-7和WO 2009/098450)。简而言之，在噬菌体上展示了包含三个半胱氨酸残基和两个六随机氨基酸的区域(Cys-(Xaa)₆-Cys-(Xaa)₆-Cys)的线性肽的组合文库，并通过将半胱氨酸侧链共价连接至小分子(三-(溴甲基)苯)而得以环化。

发明内容

根据本发明的第一方面，提供了异串联双环肽复合物，其包含：

(a)结合EphA2的第一肽配体，其具有序列A-[HArg]-D-C_i[HyP]LVNP LC_iiLEP[d1Nal]WTC_iii(SEQ ID NO：1；BCY13118)；其通过N-(酸-PEG₃)-N-双(PEG₃-叠氮化物)接头与以下缀合，

(b)两个结合CD137的第二肽配体，其具有序列Ac-C_i[tBuAla]PE[D-Lys(PYA)]PYC_iiFADPY[Nle]C_iii-A(SEQ ID NO：2；BCY8928)；