[发明专利]IL-2组合物及其使用方法

权利要求书

1.可活化的前蛋白，其包含第一多肽和第二多肽，其中所述第一多肽包含第一掩蔽部分和IL-2蛋白，其中所述第一掩蔽部分包含第一结合部分和与所述IL-2蛋白融合的第一接头，

其中所述第二多肽包含第二掩蔽部分和IL-2结合蛋白，其中所述第二掩蔽部分包含第二结合部分和与所述IL-2结合蛋白融合的第二接头，

其中所述第一和第二掩蔽部分通过其各自的第一和第二结合部分结合在一起，任选地作为二聚体，从而掩蔽所述IL-2蛋白的结合位点，所述结合位点在体外或体内与存在于免疫细胞表面的IL-2Rβ/γc链结合。

并且其中所述第一接头或第二接头中的至少一个是可切割接头。

2.根据权利要求1所述的可活化前蛋白，其中所述IL-2蛋白包含、由或基本上由以下氨基酸序列组成，所述氨基酸序列与选自S1表的序列或与SEQ ID NO:1(全长野生型人IL-2)的氨基酸21-153具有至少80、85、90、95、98或100％同一性，任选地所述氨基酸序列包含如SEQ ID NO:1所定义的C145X(X是任意氨基酸)或C145S取代。

3.根据权利要求1或2所述的可活化前蛋白，其中所述IL-2蛋白包含、由或基本上由与SEQ ID NO：2(具有C125S取代的成熟人IL-2)，任选地其中IL-2蛋白保留如SEQ ID NO:2所定义的S125残基具有至少80、85、90、95、98或100％同一性的氨基酸序列组成。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的可活化前蛋白，其中所述IL-2蛋白包含一个或多个选自如SEQ ID NO:2所定义的K35C、R38C、T41C、F42C、E61C和V69C的取代。

5.根据权利要求4所述的可活化前蛋白，其中所述IL-2蛋白与所述IL-2结合蛋白形成二硫键，任选地通过权利要求4中的一种或多种半胱氨酸和IL-2结合蛋白中的一种或多种半胱氨酸。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的可活化前蛋白，其中所述IL-2蛋白如SEQ ID NO:2所定义在位置69、74或128处包含一个或多个氨基酸取代，任选地其中所述一个或多个氨基酸取代选自如SEQ ID NO:2所定义的V69A、Q74P和I128T。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的可活化前蛋白，其中所述IL-2蛋白在如SEQ IDNO:2所定义的R38、F42、Y45、E62、E68和/或L72位置处包含一个或多个氨基酸取代，任选地，其中所述一个或多个氨基酸取代选自R38A和R38K；F42A、F42G、F42S、F42T、F42Q、F42E、F42N、F42D、F42R、F42K和F42I；Y45A、Y45G、Y45S、Y45T、Y45Q、Y45E、Y45N、Y45D、Y45R和Y45K；E62A和E62L；E68A和E68V；和L72A、L72G、L72S、L72T、L72Q、L72E、L72N、L72D、L72R和L72K，包括其组合，任选地选自F42A、Y45A和L72G；R38K、F42Q、Y45N、E62L和E68V；R38K、F42Q、Y45E和E68V；R38A、F42I、Y45N、E62L和E68V；R38K、F42K、Y45R、E62L和E68V；R38K、F42I、Y45E和E68V；和R38A、F42A、Y45A和E62A的组合。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的可活化前蛋白，其中所述IL-2蛋白包含、由或基本上由与SEQ ID NO：3(成熟人IL-2“D10”变体)，任选地其中所述IL-2蛋白保留如SEQ ID：3所定义的Q74H、L80F、R81D、L85V、I86V和/或I92F取代中的任意一个或多个具有至少80、85、90、95、98或100％同一性的氨基酸序列组成。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的可活化前蛋白，其中所述IL-2结合蛋白是IL-2Rα蛋白，或者特异性结合所述IL-2蛋白的抗体或其抗原结合片段，任选地双特异性抗体或其抗原结合片段。