[发明专利]胶原酶制剂及其制备方法

说明书

这里公开了一种改善的包含胶原酶的制剂以及制备这种制剂的方法。所述包含胶原酶的制剂包括胶原酶、大约30mM至大约240mM的二糖、大约50mM至大约800mM的甘露醇；和大约6mM至大约10mM的Tris‑HCl。这里还公开了冷冻干燥的制剂和重组制剂。

相关申请的交叉引用

本申请要求2019年1月6日递交的美国临时申请第62/788,916号的优先权，该申请的全部内容通过引证在此全部并入本文。

序列表

本申请包括电子版递交的序列表，保存为txt文件，名为“117326_000001_Sequence_Listing.txt”，2020年1月3日创建，大小为17,447字节。该序列表通过引证在此并入本文。

技术领域

这里公开的内容涉及包含胶原酶的制剂，其具有改善的稳定性和存储能力。

背景技术

(来自溶组织梭菌的胶原酶(CCH))是目前获批的用于治疗杜普伊特伦氏挛缩(DC)和佩罗尼氏病(PD)的药物。目前批准的制剂以冷冻干燥饼的形式被提供，其中含有0.9mg的CCH位于3CC试管中，同时伴有稀释试管。现有的制剂(预先冷冻干燥)在试管中有大约72小时的冷冻干燥循环时间。有效的冷冻干燥是储藏时间和酶稳定性所必须的。

发明内容

这里公开的制剂包括：胶原酶，大约30mM到大约240mM的二糖；大约50mM到大约800mM的甘露醇；和大约6mM到大约10mM的Tris-HCl。

这里还提供了冷冻干燥的制剂，包括胶原酶、二糖、甘露醇和Tris-HCl。

这里还公开了重组制剂，包括：胶原酶、二糖、甘露醇、Tris-HCl；氯化钙和氯化钠。

这里还提供了试剂盒，其中所述试剂盒包括：包含所公开的任何冷冻干燥制剂的容器；以及包含无菌稀释剂的容器，所述无菌稀释剂包含氯化钙和氯化钠。

附图简要说明

当结合附图阅读时，可进一步理解发明内容以及下面具体实施方案部分。为了说明所公开的制剂，在附图中示出了所述制剂的示例性实施方案；然而，这里制剂不限于所公开的具体实施方案。在附图中：

图1说明pH对示例性制剂中蛋白质相互作用的影响，所述示例性制剂包括海藻糖、甘露醇和各种胶原蛋白。

图2A和图2B显示了示例性的过氧化氢挑战，分析了pH值和赋形剂对浊度的影响。NTU——浊度单位；PS-聚山梨酯；T-海藻糖、S-蔗糖、M-甘露醇；H2O2-过氧化氢；7.5、8.0和8.5是指制剂的pH值。

图3A，图3B，图3C，图3D，图3E，图3F，图3G，图3H，图3I，图3J，图3K，图3L，图3M，图3N，图3O，图3P，图3Q，和图3R说明不同冷冻干燥制剂饼的扫描电子显微镜(SEM)图像(Va：0.93mg/ml CCH；60mm蔗糖；112.5mM甘露醇；10mM Tris/HCl缓冲液pH 8.5；Vb：0.93mg/mlCCH；60mm蔗糖；225mm甘露醇；10mM Tris/HCl缓冲液pH 8.5；Vc：0.93mg/mlcch；60mm蔗糖；337.5mM甘露醇；10mM Tris/HCl缓冲液(pH 8.5)。

图4A，图4B，和图4C说明在128μbar(图4A)，380μbar(图4B)和1030μbar(图4C)的压力下，各种冷冻干燥制剂饼的图像。

图5A和图5B说明在128μbar(图5A)，4000μbar(图5B)的压力下，各种冷冻干燥制剂饼的图像。

图6显示了不同冷冻干燥配方中随时间变化的水分含量。

具体实施方式