[实用新型]一种分离家蚕有核精子和无核精子的装置

说明书

本实用新型属于鳞翅目昆虫二型性精细胞的分离装置技术领域，具体涉及一种分离家蚕有核精子和无核精子的装置。本实用新型的分离家蚕有核精子和无核精子的装置，包括细胞筛和设置在所述细胞筛下方、用于承接样品的样品收集装置，所述样品收集装置一端开口且所述细胞筛与所述样品收集装置的开口端相连，所述细胞筛的筛网的孔径为70‑100μm。本实用新型的分离家蚕有核精子和无核精子的装置可方便、高效的实现家蚕有核精子和无核精子的分离。

技术领域

本实用新型属于鳞翅目昆虫二型性精细胞的分离装置技术领域，具体涉及一种分离家蚕有核精子和无核精子的装置。

背景技术

家蚕属于鳞翅昆虫的一种，其精子具有二型性，即有核精子和无核精子，有核精子可以使卵受精并发育成个体；无核精子则不能使卵受精，先于有核精子进入交配的雌蛾体内在有核精子受精的过程中起到辅助作用。二型精子在亚细胞形态结构和形成时期上具有明显差异，但目前并不清楚什么样的机制导致了家蚕有核和无核精子的分化。

家蚕的精巢是雄蚕的内部生殖器官，精子形成的场所。家蚕精巢表面有众多器官丛的分布。精巢的解剖结构最外层有一层薄膜，称作外膜。内面为一层扁平细胞组成的内膜，内膜向内衍生成三个隔膜，将精巢分成四个室，精子在四个精室内发生、成熟和形成。

为了揭示精子二型性的分化机制，需要将有核精子和无核精子单独分开进行研究。1992年Minoru Osanai、梁振中等人利用Percoll密度梯度离心法从家蚕雄蛾精液中分离出有核精子和无核精子。该方法需进行密度梯度离心，获得精子数量很少，且分离效果并不好，因此没有得到广泛应用。2015年Timothy L.Karr等人用淘洗法分离了美洲帝王蝶成虫的有核精子和无核精子，但该法在家蚕中效果并不理想。

实用新型内容

本实用新型提供一种分离家蚕有核精子和无核精子的装置，以解决现有技术中家蚕有核精子和无核精子不能有效分离的技术问题。

本实用新型的分离家蚕有核精子和无核精子的装置采用如下技术方案：一种分离家蚕有核精子和无核精子的装置，其特征在于，包括细胞筛和设置在所述细胞筛下方、用于承接样品的样品收集装置，所述样品收集装置一端开口且所述细胞筛与所述样品收集装置的开口端相连，所述细胞筛的筛网的孔径为70-100μm。

优选的，所述样品收集装置内盛装有TC-100完全培养基；所述TC-100完全培养基中还包括质量浓度为10%的FBS。

优选的，所述筛网的孔径为70μm。

优选的，所述细胞筛的个数大于等于2。

优选的，所述细胞筛倒置于所述样品收集装置上方以使被截留于细胞筛筛网上的样品可通过将细胞筛置于溶液中蘸洗的方式从细胞筛中转移出去。通过把细胞筛倒置在样品收集装置上方，经过所述细胞筛的筛网并被截留于筛网上的有核精子就可以直接通过将细胞筛倒过来在溶液（例如，TC-100培养基）中沾一沾就可以将有核精子从筛网上转移出来。如果是把细胞筛正着放置的话，过滤在上层的有核精子如果想溶解下来还需要用培养基从底部冲洗，这样需要消耗大量的溶液，且不易冲洗，另外也容易造成精子浓度低需要大体积浓缩，造成后续步骤不便。正常情况下，在过滤时，筛网是位于细胞筛整体的底端（或靠近底端）的位置处；上述中的“倒置”是指在采用细胞筛过滤时，细胞筛的筛网位于细胞筛整体顶端的位置处，翻转细胞筛180度使细胞筛正置时，筛网上的样品更容易被转移出去，将其浸入含有TC-100完全培养基（液体，含10wt%FBS）的容器中时，更容易与液体接触，便于将样品转移出去，无需消耗大量溶剂且有助于维持样品的浓度。

优选的，所述细胞筛上还设有手柄。

本实用新型的有益效果是：本实用新型的分离家蚕有核精子和无核精子的装置采用

70-100μm的细胞筛对家蚕精巢细胞进行分离，可使有核精子富集于细胞筛的筛网上方，增大筛网上样品中有核精子的比例或收集到的滤液中无核精子的比例。