[发明专利]一种分离测定沙库巴曲钙盐及其杂质的方法

说明书

一种分离测定沙库巴曲钙盐及其杂质的方法，具有以下步骤，1)取沙库巴曲钙盐，加稀释剂溶解，得到浓度为0.1‑10mg/ml的试样溶液；2)取步骤1)得到的试样溶液，加稀释剂稀释50‑1000倍，得到对照溶液；3)分别向高效液相色谱仪进样等体积的试样溶液和对照溶液，采用流动相A和流动相B作为流动相进行梯度洗脱，记录色谱图，完成试样溶液中杂质的分离测定。操作简单、方便，可有效实现沙库巴曲钙盐及其杂质、杂质与杂质之间的分离和测定，从而实现控制沙库巴曲钙盐及其产品质量的目的。

技术领域

本发明涉及分析化学领域，特别涉及一种分离测定沙库巴曲钙盐及其杂质的方法。

背景技术

沙库巴曲钙盐为诺华开发的NEP抑制剂前体药物，也是实验性药物。其作用机制可阻断威胁负责降低血压的2种多肽，主要用于开发成治疗高血压、心衰的药物。沙库巴曲钙与缬沙坦结合成的LCZ696为首个2型血管紧张素受体(ATⅡ)和脑啡肽酶双重抑制剂，临床疗效显著，并于2015年7月获FDA批准上市，沙库巴曲钙盐作为LCZ696片分子结构中的一个结构片段，也可作为一个单独的药物来看待，因此，对其有关物质建立控制指标，也是质量标准中非常关键的控制项目。沙库巴曲钙盐化学名称为：(2R,4S)-5-联苯-4-基-4-(3-羧基丙酰基氨基)-2-甲基-戊酸乙酯钙盐，化学结构式如式(a)所示。

在合成该化合物的过程中，有几步重要的中间体和未知杂质可能会由于去除不完全而影响药物的纯度和质量，这些已知中间体和未知杂质以及产生的降解产物即为药物质量控制中通常所说的有关物质(即杂质)。对于沙库巴曲钙盐的合成主要控制的已知杂质有十四个，分别是：杂质IPA、杂质AHUE、杂质AHUQ、杂质AHUH、杂质AHUP、杂质AHUD、杂质AHUJ、杂质AHUN、杂质AHUM、杂质AHUG、杂质AHUK、杂质AHUI、杂质AHUL、杂质AHUF，其结构式见下式(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)。

可见，沙库巴曲钙盐的杂质较多，且结构类似，给分离带来难度，另外，各个杂质的极性各不相同，在满足沙库巴曲钙盐与各个杂质分离的前提下，还要满足杂质与杂质之间的分离，这使检测增大了难度。采用常规的检测手段方法难以实现沙库巴曲钙盐与杂质以及杂质与杂质之间的有效分离，这会影响沙库巴曲钙盐的质量控制。

为了准确地控制沙库巴曲钙盐产品的质量，有必要研究一种能简单、快速、准确地分离检测出沙库巴曲钙盐有关物质的方法。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种分离测定沙库巴曲钙盐及其杂质的方法，其操作简单、方便，可有效实现沙库巴曲钙盐及其杂质、杂质与杂质之间的分离和测定，从而实现控制沙库巴曲钙盐及其产品质量的目的。

本发明的技术方案是：一种分离测定沙库巴曲钙盐及其杂质的方法，包括以下步骤：

1)制备试样溶液

取沙库巴曲钙盐，加稀释剂溶解，得到浓度为0.1-10mg/ml的试样溶液；

2)制备对照溶液

取步骤1)得到的试样溶液，加稀释剂稀释50-1000倍，得到对照溶液；

3)分别向高效液相色谱仪进样等体积的步骤1)的试样溶液、步骤2)的对照溶液，进样量为5μl-100μl，

采用流动相A和流动相B作为流动相进行梯度洗脱，流动相的流速为0.8-1.2ml/min，利用200nm至280nm波长检测，记录色谱图，完成试样溶液中杂质的分离测定，